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Estudos estruturais de duas enzimas envolvidas na biosíntese de goma xilelana produzida pela bactéria Xylella fastidiosa

Processo: 01/09703-7
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de abril de 2002
Vigência (Término): 31 de março de 2006
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
Pesquisador responsável:Glaucius Oliva
Beneficiário:Claudia Aparecida Alves
Instituição-sede: Instituto de Física de São Carlos (IFSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:98/14138-2 - Center for Structural Molecular Biotechnology, AP.CEPID

Resumo

O objetivo principal do projeto apresentado aqui será o de estudar duas enzimas envolvidas na via metabólica da goma xilelana, produzida pela bactéria Xylella fastidiosa, agente patogênico da Clorose Variegada de Citrus (CVC ou amarelinho). Estudos recentes tem evidenciado a importância da síntese de exopolisacarídeo (goma) na patogenicidade de outras bactérias. O desenvolvimento deste plano de trabalho terá duas abordagens que esperamos sejam as melhores para a formação da aluna e para obtenção de resultados. O projeto envolverá o estudo estrutural de uma das proteínas da via (uma glicosiltransferase chamada de GumH) que já teve seu gene clonado em vetor de expressão, a proteína foi expressa e protocolos de purificação foram estabelecidos. Assim, testes de cristalização da proteína serão iniciados e a partir dos cristais obtidos será determinada a estrutura tridimensional da enzima GumH através da técnica de difração de raios-X. Ó outro enfoque do projeto será o de estudar desde a clonagem, expressão, purificação, cristalização e determinação da estrutura de outra enzima (GumM) envolvida na biosíntese da goma xilelana. Os resultados obtidos nestes estudos contribuirão para o melhor conhecimento da via biosintética da goma e poderão ser amplamente utilizadas no planejamento racional de moléculas inibidoras, com potencial uso aplicado no controle da doença CVC in vivo. (AU)