Estudos estruturais e cinéticos da enzima purina nucleosídeo fosforilase de Schistosoma mansoni

• Processo: 99/09304-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 1999
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2003
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Richard Charles Garratt
• Beneficiário: Humberto D'Muniz Pereira
• Instituição Sede: Instituto de Física de São Carlos (IFSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Schistosoma mansoni Esquistossomose Purina-nucleosídeo fosforilase
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cristalografia | Enzimologia | Esquistossomose | Purina Nucleosideo Fosforilase | Raios X | Schistosoma Mansoni

Resumo

O Schistosoma mansoni, parasita responsável pela esquistossomose, doença que afeta cerca de 300 milhões de pessoas em todo mundo, não possui a via de síntese de purinas ou via "de novo", dependendo integralmente da via de salvação de purinas para seu suprimento de bases de purina. No Projeto Genoma de Schistosoma mansoni o Edna para a enzima Purina Nucleosídeo Fosforilase (PNP) foi identificado. Esta enzima é uma das participantes da via de salvação de purinas. Este gene foi totalmente seqüenciado e clonado no vetor de expressão pMAL. Após a clivagem da proteína de fusão com Fator Xa a SmPNP foi purificada utilizando uma coluna de troca catiônica (Poros 20SP). A SmPNP assim purificada e ativa para inosina e guanosina. Duas condições de cristalização se mostraram promissoras para a obtenção de monocristais da SmPNP. Os objetivos principais deste projeto de doutorado são a determinação experimental da estrutura tridimensional da SmPNP, por difração de raios X, com posterior resolução de estrutura cristalográfica empregando o método de substituição molecular, como também a total caracterização cinética da SmPNP. Ainda serão realizadas buscas por compostos naturais que inibam a SmPNP. A conclusão destes objetivos nos permitirá avaliar a SmPNP como um possível alvo quimioterápico na esquistossomose. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

PEREIRA‚ HM; BERDINI‚ V.; CLEASBY‚ A.; GARRATT‚ RC. Crystal structure of calf spleen purine nucleoside phosphorylase complexed to a novel purine analogue. FEBS Letters, v. 581, n. 26, p. 5082-5086, 2007. (98/14138-2, 99/09304-3)

PEREIRA, HUMBERTO M.; BERDINI, VALERIO; FERRI, MARIANA R.; CLEASBY, ANNE; GARRATT, RICHARD C.. Crystal structure of Schistosoma purine nucleoside phosphorylase complexed with a novel monocyclic inhibitor. Acta Tropica, v. 114, n. 2, p. 97-102, MAY 2010. (06/60280-3, 99/09304-3, 98/14138-2)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

PEREIRA, Humberto D'Muniz. Enzima purina nucleosideo fosforilase de Schistosoma Mansoni: estruturas cristalográficas, estudos cinéticos e descoberta de novos ligantes. 2003. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Física de São Carlos (IFSC/BT) São Carlos.