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Determinação de um possível método para a quantificação de enzimas proteolíticas secretadas por bactérias de interesse biotecnológico através da utilização de substratos de fluorescência apagada

Processo: 98/00524-8
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de maio de 1998
Vigência (Término): 31 de outubro de 2000
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Bioquímica e Molecular
Pesquisador responsável:Ivo Lebrun
Beneficiário:Elen Aquino Perpetuo
Instituição-sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Enzimas proteolíticas   Substratos

Resumo

Atualmente a quantificação da toxina tetânica é feita através do ensino de limite de Floculação (Lf), que determina a quantidade de toxina produzida pela imunoprecipitação com um antissoro padrão utilizando duas séries de diluições sucessivas. Este método, embora internacionalmente aceito possui vários inconvenientes, podendo haver precipitação inespecífica. O ensaio é demorado e a sensibilidade é baixa. Sendo assim com base nas informações sobre o mecanismo de ação enzimático da toxina tetânica, procuraremos estudar um possível método de quantificação mais sensível e especifico, através da utilização de substratos peptídicos com apagamento intermolecular, desenhados a partir da sequência da sinaptobrevina, que contém a ligação peptídica susceptível a enzima. Devido à importância da toxina tetânica na produção de vacinas, e como estudo mais intensivo nas neurotoxinas clostridiais, é importante que se desenvolva um método de quantificação de toxina mais sensível, especifico e rápido. (AU)

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