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Estudo de especificidade e padronização do método de dosagem em urina humana das serino endopeptidase H1, serino tiol endopeptidase H2, prolil endopeptidase e endopeptidase neutra (nep-like) utilizando substratos fluorogênicos com apagamento intramolecular

Processo: 98/00543-2
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de maio de 1998
Vigência (Término): 30 de abril de 2000
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
Pesquisador responsável:Dulce Elena Casarini
Beneficiário:Beata Marie Redublo Quinto
Instituição-sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Cininas   Endopeptidases   Prolil endopeptidase   Enzimas proteolíticas

Resumo

Detectamos em urina humana a atividade proteolítica relativa à nep-like, serino endopeptidases H1 e H2, e H. Buscando substrato mais sensível e baseado na ação destas enzimas sobre a molécula de bradicinina (BK), será desenvolvido um substrato fluorogênlco análogo a BK, bloqueada por ABZ (ácido orto-amino benzoico) e EDDNP (n-[2,4-,dinitroben-etilenodiamina]) denominado ABZ-RPPGFSPFRQEDDNP, bem como outros substratos fluorogênicos para que possamos estudar a especificidade das endopeptidases. Através da técnica de micropunção as endopeptidases já foram localizadas ao longo do néfron (Casarinl e Cols. 1997). Padronizaremos um método extremamente sensível para a quantificação das endopeptidases excretadas na urina humana usando o substrato ABZBKQEDDNP, bem como os substratos específicos desenvolvidos para cada endopeptidase, derivados da BK bloqueada, que auxilie no diagnóstico de diferentes doenças renais. (AU)