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Avaliação dos efeitos da criopreservação do sêmen bovino quanto à motilidade, viabilidade espermática, integridade acrossômica e função mitocondrial determinadas por citometria de fluxo

Processo: 00/14653-6
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de maio de 2001
Vigência (Término): 30 de abril de 2005
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
Pesquisador responsável:Rubens Paes de Arruda
Beneficiário:Eneiva Carla Carvalho Celeghini
Instituição-sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Criopreservação animal   Sêmen animal   Citometria de fluxo   Bovinos

Resumo

Este experimento será realizado utilizando-se 8 touros cruzados submetidos, cada um, a dez colheitas de sêmen em vagina artificial. Logo após a colheita o sêmen será avaliado quanto volume, concentração, motilidade espermática, realizada por sistema computadorizado (CASA), função mitocondrial, avaliada utilizando-se o corante iodeto de 5,5',6,6' - tetracloro - 1,1,3,3' - tetraetilbenzimidazolilcarbocianina (JC-1) (GRAVANCE et al., 2000) e Rodamina 123 (123), viabilidade espermática e integridade acrossômica associando-se as sondas: iodeto de propídio (PI), identifica as células mortas, corando-as de vermelho, e fluoresceína conjugada com aglutinina de Pisum sativum (FITC-PSA), para verificar integridade de acrossomo (CASEY et al., 1993), avaliados em citometria de fluxo. Após as avaliações o sêmen será crio preservado em palhetas de 0,5 mL com uma concentração de 50 x 106 espermatozóides. O sêmen será criopreservado em dois diluidores diferentes, o Tris (diluidor com duas frações A e B) e o Tes (diluidor de fração única). Após a criopreservação o sêmen será analisado quanto à motilidade, função mitocondrial, viabilidade espermática e integridade de acrossomo, como descrito anteriormente, além de ser submetido ao teste de termorresistência rápida, realizado de acordo com ARRUDA et al. (1992), sendo imediatamente avaliado quanto aos mesmos parâmetros citados anteriormente (motilidade espermática, função mitocondrial, viabilidade espermática e integridade acrossômica). (AU)

Publicações científicas (4)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
CARVALHO CELEGHINI, ENEIVA CARLA; CESAR DE ANDRADE, ANDRE FURUGEN; RAPHAEL, CLAUDIA FERNANDES; NASCIMENTO, JULIANA; TICIANELLI, JANAHI SOUZA; DE ARRUDA, RUBENS PAES. Damage Assessment of the Equine Sperm Membranes by Fluorimetric Technique. Brazilian Archives of Biology and Technology, v. 53, n. 6, p. 1285-1292, NOV-DEC 2010. Citações Web of Science: 6.
CELEGHINI, E. C. C.; NASCIMENTO, J.; RAPHAEL, C. F.; ANDRADE, A. F. C.; ARRUDA, R. P. Simultaneous assessment of plasmatic, acrosomal, and mitochondrial membranes in ram sperm by fluorescent probes. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 62, n. 3, p. 536-543, JUN 2010. Citações Web of Science: 17.
CELEGHINI‚ E.C.C.; DE ARRUDA‚ R.P.; DE ANDRADE‚ A.F.C.; NASCIMENTO‚ J.; RAPHAEL‚ C.F.; RODRIGUES‚ P.H.M. Effects that bovine sperm cryopreservation using two different extenders has on sperm membranes and chromatin. Animal Reproduction Science, v. 104, n. 2, p. 119-131, 2008.
ECC CELEGHINI; RP ARRUDA; R ALBUQUERQUE; FHA SILVA; DE FARIA; AFC ANDRADE; J NASCIMENTO; CF RAPHAEL. Utilization of fluorescent probe association for simultaneous assessment of plasmatic, acrosomal, and mitochondrial membranes of rooster spermatozoa. Brazilian Journal of Poultry Science, v. 9, n. 3, p. 143-149, Set. 2007.
Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
CELEGHINI, Eneiva Carla Carvalho. Efeitos da criopreservação do sêmen bovino sobre as membranas plasmática, acrossomal e mitocondrial e estrutura da cromatina dos espermatozóides utilizando sondas fluorescentes. 2005. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia São Paulo.

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