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Estudo de interações hidrofóbicas na região COOH-terminal da tropomiosina

Processo: 97/03662-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de agosto de 1997
Vigência (Término): 31 de janeiro de 2000
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Shaker Chuck Farah
Beneficiário:Aurea Denise de Sousa Soller Ferreira
Instituição-sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Tropomiosina   Contração muscular   Fluorescência   5-Hidroxitriptofano   Mutação

Resumo

O projeto propõe estudar interações hidrofóbicas na região COOH-terminal de a-tropomiosina de músculo esquelético de galinha. Serão construídos seis mutantes de substituição (por triptofano) de atninoácidos em uma região da estrutura "coiledcoil" (com características químicas atípicas) que coincide com segmento da tropomiosina codificado por um exon específico para músculos estriados. As proteínas mutantes, apesar de recombinantes são funcionais devido a uma fusão dipeptídica em sua região NH2-terminal. A determinação da inibição dá atividade ATPásica da miosina-actina pela tropomiosina (em filamento fino reconstruído in vitro) fornecerá informações sobre a influência da mutação na capacidade funcional da tropomiosina, enquanto a fluorescência do 5-hidroxitriptofano (incorporado durante expressão) informará sobre alterações no micro-ambiente da sonda (causadas pela interação com as outras proteínas do filamento). (AU)