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Desenvolvimento de novos vetores de expressão para apresentação de antígenos de pneumococo em BCG recombinante

Processo: 00/01746-6
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de agosto de 2000
Vigência (Término): 31 de julho de 2004
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Luciana Cezar de Cerqueira Leite
Beneficiário:Sheyla Grellet
Instituição-sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Desenvolvimento de vacinas

Resumo

Devido ao fardo que infecções por S. pneumoniae impõem a saúde pública e ao fato de que ainda não existe uma vacina adequada contra esta bactéria, tornou-se importante investir no desenvolvimento de uma vacina eficaz e de baixo custo contra o pneumococo. Este projeto tem como objetivo a expressão de PsaA (pneumococcal surface adesin A), que tem se mostrado conservada, em BCG recombinante, usando pSiaF* como promotor em diversas construções: 1) plasmídeos replicativos extra-cromossomais com gene de resistência a kanamicina (os quais já dispomos), para testar a imunogenicidade da PsaA expressa em BCG; 2) Desenvolvimento de vetores de expressão em micobactéria sem marcador de resistência a antibiótico: i) constituição de um auxotrofo de leuD por recombinação homóloga, utilizando contra-seleção com SacB e construção de um vetor de expressão contendo o gene para complementação; e ii) utilização do gene do leuD como sítio de inserção de um cassete de expressão de PsaA por recombinação homóloga, utilizando a metodologia de sacB. Analise da resposta imune induzida por vacinas de SCG recombinante expressando a PsaA em camundongos. (AU)