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Caracterização da RNA polimerase de "Trypanosoma cruzi"

Processo: 01/00021-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de maio de 2001
Vigência (Término): 30 de abril de 2003
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Sergio Schenkman
Beneficiário:Fernando de Macedo Dossin
Instituição-sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:98/15979-0 - Organização nuclear e controle da expressão gênica, AP.TEM
Assunto(s):RNA polimerase II   Transcrição genética

Resumo

Procuraremos entender melhor a natureza da enzima envolvida na transcrição dos genes codantes para mRNA em T.cruzi e saber se ela contem ou não o CTD (domínio carboxi-terminal). Estudaremos a natureza bioquímica desta enzima, pretendendo mais especificamente: 1) Identificar, purificar e caracterizar atividades de transcrição a partir de extratos nucleares de T. cruzi, focalizando nas frações com maior sensibilidade a amanitina (pol II e pol III). 2) Detectar nos diferentes tipos de enzima a presença do CTD utilizando anticorpos gerados a partir de recombinantes para esta região. 3) Realizar ensaios de transcrição in vitro utilizando os promotores SL (splice leader), ou seqüências divergentes encontradas em cromossomos de tripanosomas com extratos nucleares e as enzimas purificadas, ou parcialmente purificadas. (AU)