Caracterizacao eletrofisiologica de receptores purinergicos em celulas de "leydig" de camundongos.

• Processo: 00/14599-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2001
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2003
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Celular
• Pesquisador responsável: Wamberto Antonio Varanda
• Beneficiário: Luiz Artur Poletto Chaves
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Células intersticiais do testículo Trifosfato de adenosina Concentração de íons de hidrogênio Técnicas de Patch-Clamp Receptores purinérgicos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Atp | Celulas De Leydig | Patch-Clamp | Ph | P2X | Receptores Purinergicos

Resumo

Nucleotídeos intracelulares possuem uma importância fundamental no metabolismo energético, síntese de ácidos nucleicos e regulação enzimática. Vários estudos tem-se dedicado em descrever os efeitos extracelulares de nucleotídeos, entre eles o ATP, em tecidos e células isolados devido sua ação em receptores da superfície envolvidos na sinalização transmembrana, hoje chamados de receptores P2x (ionotrópicos)e P2y (metabotrópicos). Este projeto tem como objetivo a detecção e caracterização de receptores purinérgicos em células de Leydig através da caracterização das correntes eliciadas por ATP (e análogos) através da técnica de "patch-clamp" variante "whole-cell", com respeito as propriedades farmacológicas de respostas a agonistas e antagonistas, estudar o processo de dessensibilização (inativação) das respostas aos agonistas analisando-se a influência do pH extracelular no mesmo e ativação de canais para potássio ativados por cálcio. Juntamente com os estudos eletrofisiológicos pretende-se utilizar anticorpos específicos (P2x2 e P2x5) para ensaios de imunohistoquímica. A presença de outros subtipos de receptores será avaliada através da técnica de RI-PCR em células de Leydig purificadas. (AU)