Purificacao e sequenciamento dos produtos de degradacao da proteina retinoblastoma de celulas hela durante a apoptose induzida pelo fator de necrose tumoral (tnf).

• Processo: 99/08591-9
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Vigência (Início): 01 de dezembro de 1999
• Vigência (Término): 30 de novembro de 2001
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Bioquímica e Molecular
• Pesquisador responsável: José Ernesto Belizario
• Beneficiário: Aicha Marceline Sarr
• Instituição-sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Purificação de proteínas Apoptose

Resumo

Neste projeto estão propostos experimentos de purificação dos polipeptídeos p48 e p68, gerados pela degradação da proteína retinoblastoma durante a apoptose induzida pelo TNF. A proteína retinoblastoma e seus produtos de degradação serão purificados através das técnicas de cromatografia em coluna de afinidade acoplada com anticorpos monoclonais contra a pRB {IF-8 e AF11), seguida de separação dos produtos por eletroforese em gel de poli-acrimalimida (uni e bi-dimensional), cromatografia líquida de alta eficiência e espectrometria de massa. Os produtos purificados serão submetidos a clivagem por enzima tripsina para posterior seqüenciamento dos peptídeos em seqüenciador automático e/ou técnicas de espectrometria de massa. (AU)