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Miniexon e virulencia em leishmania major.

Processo: 03/02366-0
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de setembro de 2003
Vigência (Término): 31 de março de 2007
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Angela Kaysel Cruz
Beneficiário:Juliano Simões de Toledo
Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Leishmania major   Virulência
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Gene Targeting | Homologous Recombination | Leishmania Major | Miniexon | Rrna Locus | Virulence

Resumo

O presente projeto visa estudar os mecanismos envolvidos no fenômeno de atenuação da virulência observado por Antoniazi e col., em projeto desenvolvido neste laboratório, que mostrou que a super-expressão do gene miniexon de Leishmania major, envolvido no processo de "trans-splicing", atenua o padrão da infecção de linhagens originalmente virulentas em camundongos BALB/c "in vivo". Conduziremos estudos comparativos entre as linhagens atenuada e parental virulenta através da caracterização do perfil de proteínas total nas diferentes linhagens e posterior identificação das proteínas diferendalmente expressas. Também avaliaremos comparativamente as populações\de RNA (poliadenilado ou não) presentes nestes transfectantes e os transcritos de interesse serão caracterizados. Outro objetivo contemplado neste projeto é a construção de um vetor "shuttle" que se integre, por recombinação homóloga, no lócus do rDNA, cujo promotor, reconhecido pela RNA polimerase I (Pol I), induz alta taxa de transcrição constitutivamente. Diferentes versões do recombinante serão construídas, nas quais variantes do gene miniexon serão inseridas no contexto cromossômico com o intuito de gerar linhagens atenuadas estáveis, com uso potencial para o desenvolvimento de uma vadna segura contra a leishmaniose. As possíveis alterações moleculares induzidas pela superexpressão das diferentes versões do miniexon serão avaliadas após transfecção em Leishmania. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
DE TOLEDO, JULIANO SIMOES; JUNQUEIRA DOS SANTOS, ANDRE F.; DE MOURA, TATIANA RODRIGUES; ANTONIAZI, SIMONE APARECIDA; BRODSKYN, CLAUDIA; DE OLIVEIRA, CAMILA INDIANI; BARRAL, ALDINA; CRUZ, ANGELA KAYSEL. Leishmania (Viannia) braziliensis transfectants overexpressing the miniexon gene lose virulence in vivo. Parasitology International, v. 58, n. 1, p. 45-50, . (03/02366-0, 99/12403-3, 06/50323-7)
TOLEDO, JULIANO S.; FERREIRA, TIAGO R.; DEFINA, TANIA P. A.; DOSSIN, FERNANDO DE M.; BEATTIE, KENNETH A.; LAMONT, DOUGLAS J.; CLOUTIER, SERGE; PAPADOPOULOU, BARBARA; SCHENKMAN, SERGIO; CRUZ, ANGELA K.. Cell homeostasis in a Leishmania major mutant overexpressing the spliced leader RNA is maintained by an increased proteolytic activity. INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOCHEMISTRY & CELL BIOLOGY, v. 42, n. 10, p. 1661-1671, . (07/06443-0, 03/02366-0)

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