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Caracterização de genes expressos no epitélio olfatório

Processo: 03/04029-1
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
Vigência (Início): 01 de novembro de 2003
Vigência (Término): 29 de fevereiro de 2008
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Bettina Malnic
Beneficiário:Jussara Michaloski Souza
Instituição-sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Hibridização in situ   Neurônios receptores olfatórios   Proteínas PrPC

Resumo

Os receptores olfatórios (ORs) pertencem a uma superfamília de receptores acoplados à proteína G (GPCRs). Estima-se que 1000 diferentes tipos de OR são expressos no epitélio olfatório. A expressão funcional de ORs em sistemas celulares heterólogos tem se mostrado difícil de ser conseguida. Na maioria dos casos os ORs não são enviados à membrana plasmática, ficando retidos no retículo endoplasmático. Os ORs são exemplos de GPCRs sensoriais que requerem chaperonas e talvez outras proteínas específicas para adequada expressão na superfície celular. O estudo das interações entre proteínas presentes nos neurônios olfatórios e ORs é importante para a compreensão do funcionamento destes GPCRs. No laboratório em questão estamos utilizando o ensaio de duplo híbrido em leveduras para analisar potenciais interações entre proteínas com um domínio específico do OR M93. Sete proteínas ligantes candidatas já foram identificadas e com a técnica de hibridização in situ pretendemos analisar a expressão destas no epitélio olfatório. Ainda utilizando técnica de hibridização in situ, verificamos anteriormente, que a forma celular proteína príon (PrPc) é expressa em neurônios olfatórios e em células que participam de sinapses com os dendritos dos axônios dos neurônios olfatórios. Estes dados levantam a hipótese da participação de PrPc na formação destas sinapses. Pretendemos também neste projeto caracterizar o padrão de expressão de PrPc no sistema olfatório de camundongos. (AU)