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Estudos das características cinéticas da fosfatase alcalina reconstituída em sistemas vesiculares

Processo: 03/06617-8
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
Vigência (Início): 01 de abril de 2004
Vigência (Término): 31 de julho de 2008
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
Pesquisador responsável:Pietro Ciancaglini
Beneficiário:Ana Maria Sper Simão
Instituição-sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Fosfatase alcalina   Cinética enzimática   Lipossomos   Osteoblastos   Biomimética

Resumo

A fosfatase alcalina, que se localiza nas membranas das vesículas da matriz extracelular, é requerida para o processo de mineralização de ossos e cartilagem. Recentes estudos de nosso laboratório permitiram a construção de sistemas vesiculares de fosfatase alcalina associada a lipossomos e células ghost resseladas, que podem mimetizar a função das vesículas que atuam naturalmente durante o processo de biomineralização, além de poderem ser empregadas no estudo do efeito dos fosfolipídeos e da enzima em sistemas in vitro. Nesse projeto pretendemos desenvolver uma metodologia para a obtenção, solubilização e purificação da fosfatase alcalina empregando culturas de osteoblastos, além de sua caracterização cinética e incorporação em sistemas vesiculares. Além disso pretendemos estudar o efeito do microambiente da membrana sobre a atividade da enzima. De fato, como já foi demonstrado em nosso laboratório, a enzima pode mudar a velocidade de hidrólise de diversos substratos de maneira diferente quando associada aos sistemas vesiculares. A compreensão destas mudanças nas características cinéticas são muito importante para explicar um possível mecanismo de regulação da enzima bem como seu papel durante a osteogênese. Assim, devido às inúmeras vantagens do trabalho com culturas de células, em relação à metodologia anteriormente utilizada, será possível realizar os estudos de mineralização in vitro e in vivo trazendo um significativo avanço do conhecimento do processo. (AU)

Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
SIMÃO, Ana Maria Sper. Estudos das características cinéticas da fosfatase alcalina reconstituída em sistemas vesiculares. 2008. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto Ribeirão Preto.

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