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Expressão, purificação e caracterização de proteínas de superfície de Leptospira interrogans

Processo: 03/10028-8
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
Vigência (Início): 01 de abril de 2004
Vigência (Término): 31 de março de 2009
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Ana Lucia Tabet Oller Do Nascimento
Beneficiário:Marina von Atzingen dos Reis
Instituição-sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Leptospira interrogans   Genômica funcional   Desenvolvimento de vacinas

Resumo

Leptospirose é uma zoonose altamente disseminada causada por espécies patogênicas do gênero Leptospira (Levett, 2001). Os roedores são os principais reservatórios da doença nos centros urbanos. Anualmente, são relatados a FU NASA/MS cerca de 5000 casos, que ocorrem como surtos epidêmicos nas épocas de chuva. O desenvolvimento de uma vacina é critico, visto que a contenção da proliferação de roedores é pouco viável e não há vacina licenciada para uso em humano. Buscando obter uma vacina de proteção efetiva e mínimos efeitos adversos, estudos atuais têm buscado caracterizar e identificar as proteínas envolvidas na patogenicidade de L. interrogans. O presente projeto propõe expressar 15 proteínas clonadas em vetor de E. coli durante o Projeto Funcional do Genoma da Leptospira interrogans. Estes genes foram selecionados a partir das seqüências do genoma de L. interrogans sorovar Copenhageni (AEG/ONSA/Instituto Butantan/FAPESP) e codificam proteínas expostas e/ou associadas a membrana externa. As proteínas recombinantes serão purificadas por cromatografia de afinidade a metal e inoculadas em camundongos para obtenção de soros hiperimunes. Estes soros serão utilizados como sonda para avaliar o reconhecimento de proteínas do extrato total de Leptospira spp de diferentes sorovares. As proteínas que estiverem presentes em diferentes leptospiras patogênicas serão avaliadas quanto a atividade imunoprotetora em modelo animal. (AU)