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Isolamento e caracterização de transcritos sexo-específicos em peixes utilizando a técnica de DDRT-PCR (Differential Display Reverse Transcriptase): modelo inicial para implementação de linha de pesquisa em expressão gênica diferencial

Processo: 03/11702-4
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Apoio a Jovens Pesquisadores
Vigência (Início): 01 de dezembro de 2003
Vigência (Término): 11 de junho de 2006
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Animal
Pesquisador responsável:Adriane Pinto Wasko
Beneficiário:Adriane Pinto Wasko
Instituição-sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:03/06761-1 - Isolamento e caracterização de transcritos sexo-específicos em peixes utilizando a técnica de DDRT-PCR (differential display reverse transcriptase): modelo inicial para implementação de linha de pesquisa em expressão gênica diferencial, AP.JP
Assunto(s):Peixes   Expressão gênica   Determinação do sexo animal   Perfilação da expressão gênica   DNA complementar

Resumo

A implementação de estudos de expressão gênica diferencial no Departamento de Morfologia do Instituto de Biociências da UNESP-Botucatu mostra-se extremamente importante para a complementação, fortificação e atualização de suas atuais linhas de pesquisa nas áreas de Biologia Celular e Molecular, Histologia e Embriologia. Neste sentido, a técnica de "display" diferencial (DO), metodologia relativamente simples e de baixo custo para identificação de genes diferencialmente expressos, foi selecionada como modelo para a implementação de estudos de expressão gênica diferencial - através de transcrição reversa de RNA utilizando um "primer" ancorador, seguida de reação em cadeia da polimerase (PCR) do DNA complementar utilizando um "primer" arbitrário, diferenças de expressão gênica entre amostras distintas podem ser visualizadas através de eletroforese em gel de poliacrilamida. Como objeto inicial de estudo, a espécie leporinus macrocephalus, peixe de grande importância econômica e que apresenta um sistema cromossômico de determinação sexual do tipo ZZ/ZW, foi selecionada para a identificação e caracterização de transcritos sexo-específicos. Os resultados configurarão dados extremamente importantes para a compreensão da origem e evolução dos mecanismos de determinação e diferenciação sexual em peixes e, de uma forma geral, em vertebrados. (AU)