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Caracterização genética e funcional de 9 genes nucleares de provável função mitocondrial em Saccharomyces Cerevisiae

Processo: 03/10163-2
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de abril de 2004
Vigência (Término): 31 de março de 2006
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
Pesquisador responsável:Francisco Gorgônio Nóbrega
Beneficiário:Raquel Fonseca Guedes Monteiro
Instituição-sede: Instituto de Pesquisa e Desenvolvimento (IP&D). Universidade do Vale do Paraíba (UNIVAP). São José dos Campos , SP, Brasil
Assunto(s):Clonagem   Mutantes   Mitocôndrias   Saccharomyces cerevisiae

Resumo

Este projeto pretende contribuir para uma maior compreensão da função e biogênese da mitocôndria de Saccharomyces cerevisiae, um organismo modelo nos estudos da função mitocondrial, estudando 9 genes ainda não caracterizados, de fenótipo definido em estudos globais do genoma da levedura e com deficiência de crescimento em meios não fermentáveis. Pretendemos: 1) examinar com os métodos computacionais existentes, as características destes genes putativos incluindo estudos comparativos, motivos protéicos e segmentos transmembrana e evidências de interação em estudos globais; 2) confirmar o fenótipo de deficiência respiratória nas linhagens de referência (Euroscarf) e gerar inativação confirmatória em linhagem independente, confirmando a complementação pelo gene selvagem correspondente; 3) examinar nos mutantes a estabilidade do genoma mitocondrial, o crescimento dos mutantes em diferentes meios e temperaturas, o espectro dos citocromos, a atividade dos complexos de transferência eletrônica nos segmentos NADH - citocromo c; citocromo c - oxigênio, a atividade da ATPase mitocondrial e a síntese protéica mitocondrial; 4) aprofundar os estudos em um dos mutantes, buscando a localização intracelular e organelar da proteína, existência de genes supressores multicópia e proteínas que interagem, mutagênese sítio dirigida para correlação estrutura/função e eventualmente outros estudos apropriados para o gene escolhido. (AU)