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Caracterização funcional e estrutural de uma metaloprotease com atividades bactericida e anti-tumoral isolada do veneno de Bothrops Jararacussu

Processo: 04/00464-8
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de junho de 2004
Vigência (Término): 31 de agosto de 2007
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Farmacologia - Toxicologia
Pesquisador responsável:José Roberto Giglio
Beneficiário:Silvana Marcussi
Instituição-sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Imunoquímica

Resumo

As metaloproteases de venenos de serpentes são responsáveis pelo efeito hemorrágico induzido pelas serpentes Viperinae e Crotalinae. Este projeto propõe a caracterização bioquímica e estrutural de uma metaloprotease do veneno de Bothrops jararacussu, sua caracterização funcional (atividades enzimáticas, tóxicas e farmacológicas). Esta protease será isolada por cromatografia de troca iônica e utilizada para caracterização bioquímica e funcional. A seqüência completa da metaloprotease será determinada pelo seqüenciamento do cDNA obtido de uma biblioteca pré- existente, além de clonagem e expressão da proteína. As atividades enzimáticas serão avaliadas sobre diferentes substratos com variações de concentrações de enzima, pH, temperatura, íons divalentes, agentes quelantes e tempo de incubação. Esta protease também será testada quanto aos efeitos tóxicos e farmacológicos. Os estudos serão complementados com ensaios imunoquímicos, abrangendo produção e purificação de anticorpos policlonais, testes de imunorreatividade cruzada e neutralização de atividades tóxicas e farmacológicas. Os aspectos abordados neste trabalho poderão trazer informações complementares sobre mecanismos de ação, relacionando estrutura e função. (AU)

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
ROBERTO, PATRICIA G.; KASHIMA, SIMONE; MARCUSSI, SILVANA; PEREIRA, JOSE O.; ASTOLFI-FILHO, SPARTACO; NOMIZO, AURO; GIGLIO, JOSE R.; FONTES, MARCOS R. M.; SOARES, ANDREIMAR M.; FRANCA, SUZELEI C. Cloning and Identification of a Complete cDNA Coding for a Bactericidal and Antitumoral Acidic Phospholipase A(2) from Bothrops jararacussu Venom. The Protein Journal, v. 23, n. 4, p. 273-285, May 2004. Citações Web of Science: 46.

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