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Inovação incremental no processo de seleção do sexo de espermatozoides bovinos por centrifugação em gradiente de densidade vidando facilitar a implementação em escala em empresas de congelação de sêmen e produção in vitro de embriões

Processo: 04/06044-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de abril de 2005
Vigência (Término): 30 de novembro de 2007
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
Pesquisador responsável:Vera Fernanda Martins Hossepian de Lima
Beneficiário:Max Vitória Resende
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
Assunto(s):Reação em cadeia da polimerase em tempo real   Espermatozoides animal   Bovinos

Resumo

Constituem objetivos, inicialmente propostos, para o presente projeto: a) utilizar sistema de centrifugação com fluxo contínuo em gradiente contínuo de densidade, para produzir amostras de sêmen enriquecidas com espermatozoides portadores do cromossomo X; b) avaliar a eficiência deste sistema de centrifugação na sexagem de espermatozoides; c) avaliar a viabilidade dos espermatozoides sexados pela taxa de produção in vitro de embriões; d) verificar pela PCR o desvio na proporção sexual nos embriões produzidos in vitro com os espermatozoides centrifugados; e) Utilizar o DNA dos espermatozoides para amplificação dos genes SRY e XIST pela PCR em tempo real; f) comparar a eficiência de validação dos itens "d" e "e". Serão utilizadas amostras de sêmen congelado de bovinos de raças europeias e zebuínas serão centrifugadas em gradiente contínuo de densidade, e, posteriormente, utilizadas para produção in vitro de embriões. Será determinada a taxa de desenvolvimento in vitro de embriões bovinos. A validação dos resultados será feita pela PCR dos (embriões. Na tentativa de facilitar e tornar mais ágil o processo de validação dos resultados, o DNA dos espermatozoides será utilizado para amplificação e quantificação pela PCR em tempo real dos genes SRY e XIST o que permitirá verificar, logo após a centrifugação, se esta enriqueceu a amostra com espermatozoides X. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
RESENDE, M. V.; LUCIO, A. C.; PERINI, A. P.; OLIVEIRA, L. Z.; ALMEIDA, A. O.; ALVES, B. C. A.; MOREIRA-FILHO, C. A.; SANTOS, I. W.; HOSSEPIAN DE LIMA, V. F. M. Comparative validation using quantitative real-time PCR (qPCR) and conventional PCR of bovine semen centrifuged in continuous density gradient. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 63, n. 3, p. 544-551, JUN 2011. Citações Web of Science: 1.
COSTA, M. Z.; OLIVEIRA, L. Z.; RESENDE, M. V.; LUCIO, A. C.; PERINI, A. P.; MIGUEL, M. C. V.; LIMA, V. F. M. H. Induction of the acrosome reaction test to in vitro estimate embryo production in Nelore cattle. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 62, n. 4, p. 771-777, AUG 2010. Citações Web of Science: 1.
Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
. Sexagem de espermatozóides bovinos por centrifugação em gradiente de densidade contínuo de Percoll e OptiPrep. 2007. Tese de Doutorado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias. Jaboticabal Jaboticabal.

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