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Desenvolvimento de um eletrodo amperometrico para determinação de glutationa em eritrocitos

Autor(es):
Percy Calvo Marzal
Número total de Autores: 1
Tipo de documento: Tese de Doutorado
Instituição: Universidade Estadual de Campinas. Instituto de Química
Data de defesa:
Membros da banca:
Lucia Helena Mascaro Sales; Marilia Oliveira Fonseca Goulart; Nelson Eduardo Duran Caballero; Pedro Luiz Onofrio Volpe
Orientador: Lauro Tatsuo Kubota
Resumo

O presente trabalho refere-se ao desenvolvimento de um novo método para determinação de glutationa em eritrócitos, utilizando o método amperométrico. Para isto um eletrodo a base de pasta de carbono modificado com o complexo tetratiofulvaleno-tetracianoquinodimetano (TTF-TCNQ) foi desenvolvido, com o intuito de possibilitar a transferência de elétrons entre a glutationa e o eletrodo a baixos potenciais. O eletrodo modificado apresentou boas características em termos de seletividade, sensibilidade e tempo de resposta, facilitando sua operacionalidade para a detecção de glutationa. Com a modificação do eletrodo foi possível obter uma resposta bastante sensível para glutationa num potencial de 200 mV vs ECS. As melhores condições foram verificadas com 20% (m/m) de TTF-TCNQ incorporado na pasta de carbono e 0,5% de Nafion (m/v). As medidas foram realizadas em tampão fosfato pH 8,0 contendo KCl 0,1 mol L e EDTA 0,5 mmol L. Nessas condições, o eletrodo modificado apresentou um intervalo de resposta linear entre 5 a 340 mmol L de glutationa ajustado pela equação Dj = 0,7(±0,1) + 90,1(±0,4)[GSH] com um coeficiente de correlação de 0.9998 para n = 20, onde a densidade de corrente Dj é dada em mA cm e a concentração da GSH em mmol L. O tempo de resposta do eletrodo foi de 0,5 s. A aplicação do eletrodo permitiu a determinação direta de glutationa em eritrócitos após lisados sem uso de reagentes adicionais. O eletrodo desenvolvido apresentou um bom limite de detecção, alta seletividade e rapidez. Quando comparado com o método espectrofotométrico este apresentou boa correlação. Os testes de recuperação mostraram que o método amperométrico teve melhor desempenho (98 - 102%) que o método espectrofotométrico (90 - 92%). (AU)

Processo FAPESP: 00/10928-0 - Desenvolvimento de um método para a quantificação da atividade da glutationa peroxidase em soro sanguíneo por técnicas eletroanalíticas
Beneficiário:Percy Calvo Marzal
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Doutorado