Estudo citoquimico e imunocitoquimico das celulas granulosas metriais em uteros de camundongos

Autor(es)

Cristiane Regina Correa da Silva

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
• Data de defesa: 1997-08-18

Membros da banca

Aureo Tatsumi Yamada; Luis Carlos Bruschi; Estela Maris Andrade Forell Bevilacqua; Leonilda Maria Barbosa dos Santos

• Orientador: Aureo Tatsumi Yamada

Resumo

As Células Granulosas Metriais (CGMs) presentes em úteros de roedores prenhes, apresentam como característica morfológica principal, um citoplasma repleto de grânulos, que contêm além da perforina, hidrolases e proteases. Estes grânulos são P AS positivos. Apresentam também antígenos de superficie que as caracterizam como sendo da linhagem NK. Porém, os fatores que determinam a sua diferenciação no endométrio, a composição química de seus grânulos, relacionada com a função destas células durante a gestação, ainda não são totalmente conhecidos. o presente trabalho foram utilizados camundongos prenhes no 9°, 11°, 13°, 5° e 17° dias de gestação (ddg), cujos fragmentos de sítios de implantação ou de placentas foram processados para inclusão em parafina, resina epóxi e resina LRWhite. Estes materiais foram submetidos aos métodos histoquímicos e cito químicos da lectina DBA (Dolichos biflorus), além da técnica de PAS, para a identificação e localização das CGMs. Foram ainda utilizados anticorpos policlonais anticatepsina D e B em métodos imunoistoquímicos e imunocitoquímicos para caracterizar a natureza lisossômica dos grânulos intracitoplasmáticos destas células. As CGMs foram identificadas ao longo do período gestacional analizado, tanto pela técnica de P AS quanto pela lectina DBA, tendo esta última apresentado maior seletividade. Estas células foram localizadas predominantemente no endométrio decidualizado e não decidualizado, e em menor proporção no miométrio da região mesometrial. A histoquímica da lectina DBA mostrou marcação nos grânulos e na superficie celular, que foi confirmada ao nível ultra-estrutural. Baseado nos padrões morfológico e histoquímico foram classificados 4 subtipos de CGMs. A freqüência destes subtipos variou no decorrer dos períodos analisados. Pelas reações imunocitoquímicas, as anticatepsinas D e B foram localizadas precisa e especificamente nos "caps" dos grânulos destas células. Os quatro subtipos de CGMs identificados no endométrio gravídico de camundongos devem corresponder às fases de diferenciação destas células, as quais podem ser identificadas pela marcação da lectina DBA na superficie celular. A presença de formas precursoras de CGMs isentas de grânulos, concomitantemente com formas em aparente degeneração ao longo do período gestacional analisado, sugere que o endométrio gravídico seja determinante para a diferenciação desta população celular. A imunocitoquímica para os anticorpos anticatepsinas D e B demonstraram que enzimas proteolíticas lisossômicas coexistem subcompartimentalizadas na região do "cap" dos grânulos das CGMs. A identificação destas enzimas proteolíticas pressupõe a sua atuação sinérgica com outros componentes líticos dos grânulos destas células (AU)

• Processo FAPESP: 94/04224-8 - Estudo citoquimico e imunocitoquimico das celulas granulosas metriais de camundongos ao nivel da microscopia optica e eletronica.
• Beneficiário: Cristiane Regina Correa da Silva
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado