Efeito dos esteroides sexuais no sistema Kisspeptinas e na diferenciação gonadal de Centropomus undecimalis.

Autor(es)

Juliana Morena Bonita Ricci

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Botucatu. 2020-11-03.
• Instituição: Universidade Estadual Paulista (Unesp). Instituto de Biociências. Botucatu
• Data de defesa: 2020-08-31
• Orientador: Rafael Henrique Nóbrega

Resumo

O robalo-flecha (Centropomus undecimalis) é um peixe hermafrodita protândrico de grande importância econômica. Um dos principais entraves na sua produção consiste na obtenção de matrizes fêmeas em cativeiro. Como alternativa, realiza-se captura de fêmeas selvagens ou induz a inversão sexual utilizando esteroides sexuais. No entanto, pouco se sabe sobre as informações genéticas relacionadas à reprodução e diferenciação sexual nesta espécie. Diante deste cenário, neste estudo procuramos entender o efeito dos esteroides sexuais no eixo reprodutivo durante a diferenciação gonadal. Para isto, analisamos a expressão da kisspeptina encefálica, a morfologia gonadal e os perfis transcriptômicos (RNA-seq) das gônadas pós-tratamento com esteroides. Para tanto, 450 animais indiferenciados foram divididos em 3 grupos os quais receberam dieta basal (controle), suplementada com 17α-metiltestosterona (MT) ou suplementada com 17β-estradiol (E2) por 45 dias. Os encéfalos e as gônadas dos animais foram coletados logo após o tratamento hormonal e em intervalos de 4 meses durante o período de 1 ano. Os resultados da expressão gênica dos encéfalos mostraram que os grupos tratados com MT e E2 apresentaram aumento nos níveis de RNAm de kiss1 em relação ao controle. Os transcritos primários do receptor kissr2 não variaram entre os tratamentos. Quanto à morfologia, o grupo tratado com MT apresentou gônada mais desenvolvida e com características morfológicas de testículo. O grupo E2 também apresentou gônada mais desenvolvida, porém com características morfológicas de ovário. Para análise do RNA-seq foi adotada a estratégia de novo. A montagem do transcriptoma gerou 45579 transcritos com uma taxa de completude 85,6% e de mapeamento de 67%. Foram identificados genes diferencialmente expressos (GDEs) entre os tratamentos, dentre eles alguns relacionados a diferenciação sexual, incluindo os genes pró-testículo (nr5a2, tbx1 dmrt3, ptch3, ptch2, shh, etc) no grupo MT, e no grupo E2 os GDEs pró-ovário (cyp19a1, foxl2, irx5, wnt4a, rspo1, fst, etc). Nossos resultados até o presente momento sugerem que os neurônios kiss1 são sensíveis a ação dos esteroides sexuais. O tratamento com MT estimulou o desenvolvimento testicular, por outro lado o E2 parece ter invertido o destino da diferenciação sexual das gônadas, resultando em um ovário no início do desenvolvimento. Por fim, o transcriptoma de novo das gônadas gerado aqui resultou em um recurso genômico valioso para a triagem de vias e genes potenciais envolvidos na diferenciação sexual de C. undecimalis. (AU)

• Processo FAPESP: 18/16595-7 - Kisspeptinas e seu papel na reprodução e desenvolvimento gonadal de peixes teleósteos.
• Beneficiário: Juliana Morena Bonita Ricci
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado