Influencia da sacarose na diversidade genotipica de estreptococos do grupo mutans detectados por ap-pcr - estudo in situ e in vivo.

Resumo

Não existem dados na literatura a respeito da influência da sacarose na diversidade genotípica dos estreptococos do grupo mutans encontrados na placa dental. Dessa forma, o objetivo do presente trabalho será avaliar a influência da sacarose na diversidade genotípica de Streptococcus mutans da placa dental formada in situ ou in vivo por meio da AP- PCR. Na fase in situ, 15 voluntários utilizarão dispositivos intra-orais palatinos, contendo 4 blocos de esmalte dental humano. Solução de sacarose 20% será gotejada sobre 2 blocos de um lado do dispositivo e água destilada e deionizada sobre outros 2 blocos do outro lado, 8 x/dia. Para o estudo in vivo, os voluntários bochecharão solução de sacarose 20% ou água dd, 8 x/ dia, durante 3 dias. A higienização dental será suspensa e a placa formada e acumulada em todos os dentes será coletada. Também serão coletadas amostras de saliva estimulada. As amostras de placa e saliva serão diluídas e inoculadas em meio MSB. Cerca de 8 colônias morfologicamente semelhantes aos estreptococos do grupo mutans de cada amostra de placa dental e saliva serão isoladas e então será realizada a extração de DNA. Então, será realizada a técnica de AP-PCR com o primer OPA-02 e os produtos resultantes da amplificação serão analisados em gel de agarose 1,5%. A documentação fotográfica dos géis será realizada em um sistema de imagem digital e analisadas por um programa de computador, para a determinação da mobilidade relativa de cada banda. (AU)