Vias de sinalização envolvidas na resposta inflamatória em modelos de cultura 3D de osteoartrite

Resumo

A resposta inflamatória envolvida na osteoartrite será estudada em modelos de cultura 3D. Este modelo permite a reprodução do microambiente das articulações, uma vez que diferentes tipos de células podem ser co-cultivados, tais como condrócitos, osteócitos e fibroblastos. As células imunológicas podem também ser adicionadas a estes modelos, permitindo a avaliação do seu papel na patogênese da osteoartrite. As culturas irão ser estimuladas por toxinas isoladas de venenos animais, cujas atividades pró-inflamatórias tenham sido anteriormente descritas, e a expressão e produção de moléculas envolvidas com a inflamação serão avaliadas. Após este screening inicial in vitro, algumas toxinas serão escolhidas para melhor elucidar as vias de sinalização desencadeadas nos diferentes tipos de células presentes na cultura 3D. O estudo das vias de sinalização envolverá diferentes ensaios, tais como a utilização de inibidores específicos e a coloração intracelular de moléculas de sinalização, que serão analisadas por citometria de fluxo multicolor e microscopia confocal, incluindo a avaliação da co-localização de marcadores. Estes estudos permitirão a identificação de novas moléculas de sinalização envolvidas com a resposta inflamatória e, possivelmente, novos alvos para o desenvolvimento de drogas anti-inflamatórias específicas para o tratamento de osteoartrite. (AU)