Papel da sirtuína 1 na ativação e diferenciação de células T CD4+ em animais obesos transplantados

Resumo

As Histonas Desacetilases (HDACs) são moléculas biológicas responsáveis pela remoção do grupo acetilo dos resíduos de lisina da histona. Entre eles, Sirtuin 1 (Sirt1) é identificada como uma molécula importante no metabolismo celular e na regulação imune. O papel de Sirt1 no sistema imune adaptativo está relacionado à ativação celular, proliferação e diferenciação para diferentes fenótipos de células T. Aqui, levantamos a hipótese de que esse papel na diferenciação Th pode ser exacerbado na Obesidade e levar a uma resposta imune mais forte contra os antígenos dadores. Em seguida, objetivamos estudar a diferenciação de Treg e Th1, Th2 e Th17 em camundongos normais e obesos e então caracterizar seu impacto na rejeição ou aceitação do enxerto em camundongos onde Sirt1 é especificamente excluído em células T CD4 +. Os ratos SIRT1 floxed em células T CD4 + (SIRT1fl/fl-CD4-Cre) e WT littermates (SIRT1 +/+ - CD4-cre) serão submetidos a um aloenxerto totalmente de pele. A perda total de aloenxerto será considerada como rejeição. O efeito de Sirt1 em células T CD4 + será determinado por citómetro de fluxo, western blot, RT-PCR para medir citoquinas, fatores de transcrição e fenótipos de ativação. A diferenciação dos subconjuntos de células T CD4 + será feita in vitro a partir de células naïves isoladas de células T CD4 + de SIRT1fl/fl-CD4-Cre e WT littermates. As células Th Ova-TCR adotadas de forma apropriada derivadas de ratos SIRT1fl/fl-CD4-Cre e WT recortados com ratos OT-II (ratinhos transgênicos Ova-TCR) serão feitas em camundongos CD4 knockout e depois enxertadas com pele expressante de OVA (ratos transgênicos expressando OVA em queratinócitos). Os mesmos parâmetros serão testados. Esperamos desvendar os mecanismos por trás do papel do Sirt1 em respostas aloimunes e adicionar novos dados inovadores neste campo. (AU)