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(Referência obtida automaticamente do Web of Science, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores.)

A Kinetic Characterization of (Na+, K+)-ATPase Activity in the Gills of the Pelagic Seabob Shrimp Xiphopenaeus kroyeri (Decapoda, Penaeidae)

Texto completo
Autor(es):
Leone, Francisco Assis [1] ; Lucena, Malson Neilson [1] ; Rezende, Luciana Augusto [1] ; Garcon, Daniela Pereira [2] ; Pinto, Marcelo Rodrigues [1] ; Mantelatto, Fernando Luis [3] ; McNamara, John Campbell [3]
Número total de Autores: 7
Afiliação do(s) autor(es):
[1] Univ Sao Paulo, Dept Quim, Fac Filosofia Ciencias & Letras Ribeirao Preto, BR-14040901 Ribeirao Preto, SP - Brazil
[2] Univ Fed Paraiba, Dept Biol Mol, Ctr Ciencias Exatas & Nat, BR-58059900 Joao Pessoa, Paraiba - Brazil
[3] Univ Sao Paulo, Dept Biol, Fac Filosofia Ciencias & Letras Ribeirao Preto, Sao Paulo - Brazil
Número total de Afiliações: 3
Tipo de documento: Artigo Científico
Fonte: Journal of Membrane Biology; v. 248, n. 2, p. 257-272, APR 2015.
Citações Web of Science: 6
Resumo

We characterize the kinetic properties of a gill (Na+, K+)-ATPase from the pelagic marine seabob Xiphopenaeus kroyeri. Sucrose density gradient centrifugation revealed membrane fractions distributed mainly into a heavy fraction showing considerable (Na+, K+)-ATPase activity, but also containing mitochondrial F0F1- and Na+- and V-ATPases. Western blot analysis identified a single immunoreactive band against the (Na+, K+)-ATPase alpha-subunit with an M-r of a parts per thousand 110 kDa. The alpha-subunit was immunolocalized to the intralamellar septum of the gill lamellae. The (Na+, K+)-ATPase hydrolyzed ATP obeying Michaelis-Menten kinetics with V-M = 109.5 +/- A 3.2 nmol Pi min(-1) mg(-1) and K-M = 0.03 +/- A 0.003 mmol L-1. Mg2+ (V-M = 109.8 +/- A 2.1 nmol Pi min(-1) mg(-1), K-0.5 = 0.60 +/- A 0.03 mmol L-1), Na+ (V-M = 117.6 +/- A 3.5 nmol Pi min(-1) mg(-1), K-0.5 = 5.36 +/- A 0.14 mmol L-1), K+ (V-M = 112.9 +/- A 1.4 nmol Pi min(-1) mg(-1), K-0.5 = 1.32 +/- A 0.08 mmol L-1), and NH4 (+) (V-M = 200.8 +/- A 7.1 nmol Pi min(-1) mg(-1), K-0.5 = 2.70 +/- A 0.04 mmol L-1) stimulated (Na+, K+)-ATPase activity following site-site interactions. K+ plus NH4 (+) does not synergistically stimulate (Na+, K+)-ATPase activity, although each ion modulates affinity of the other. The enzyme exhibits a single site for K+ binding that can be occupied by NH4 (+), stimulating the enzyme. Ouabain (K-I = 84.0 +/- A 2.1 A mu mol L-1) and orthovanadate (K-I = 0.157 +/- A 0.001 A mu mol L-1) inhibited total ATPase activity by a parts per thousand 50 and a parts per thousand 44 %, respectively. Ouabain inhibition increases a parts per thousand 80 % in the presence of NH4 (+) with a threefold lower K-I, suggesting that NH4 (+) is likely transported as a K+ congener. (AU)

Processo FAPESP: 10/16115-3 - Ontogenia da osmorregulação no camarão de água-doce Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862): expressão da (Na+, K+)-ATPase branquial, influência da composição lipídica e papel das poliaminas na atividade cinética da enzima
Beneficiário:Malson Neilson de Lucena
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Doutorado
Processo FAPESP: 10/17534-0 - Papel da (Na,K)-ATPase na osmorregulação e excreção de amônio em crustáceos eurialinos: identificação e efeitos do FXYD2 na regulação da (Na,K)-ATPase branquial do siri Callinectes danae
Beneficiário:Francisco de Assis Leone
Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Regular
Processo FAPESP: 10/06395-9 - Papel da (Na,K)-ATPase na osmorregulação e excreção de amônio em crustáceos eurialinos: identificação e efeitos do FXYD2 na regulação da (Na,K)-ATPase branquial do siri Callinectes danae
Beneficiário:Daniela Pereira Garçon
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Processo FAPESP: 10/50188-8 - Crustáceos decápodes: multidisciplinaridade na caracterização da biodiversidade marinha do estado de São Paulo (taxonomia, espermiotaxonomia, biologia molecular e dinâmica populacional) (Biodiversidade Marinha)
Beneficiário:Fernando Luis Medina Mantelatto
Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Programa BIOTA - Temático