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(Referência obtida automaticamente do Web of Science, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores.)

Molecular cloning, overexpression, purification and crystallographic analysis of a GH43-xylosidase from Bacillus licheniformis

Texto completo
Autor(es):
Diogo, Jose Alberto [1] ; Zanphorlin, Leticia Maria [1] ; Sato, Helia Harumi [2] ; Murakami, Mario Tyago [3] ; Ruller, Roberto [1]
Número total de Autores: 5
Afiliação do(s) autor(es):
[1] Natl Ctr Res Energy & Mat CNPEM, Brazilian Bioethanol Sci & Technol Lab CTBE, BR-13083100 Campinas, SP - Brazil
[2] Univ Estadual Campinas, Dept Food Sci, BR-13081970 Campinas, SP - Brazil
[3] Natl Ctr Res Energy & Mat CNPEM, Brazilian Biosci Natl Lab LNBio, BR-13083100 Campinas, SP - Brazil
Número total de Afiliações: 3
Tipo de documento: Artigo Científico
Fonte: ACTA CRYSTALLOGRAPHICA SECTION F-STRUCTURAL BIOLOGY COMMUNICATIONS; v. 71, n. 8, p. 962-965, AUG 2015.
Citações Web of Science: 1
Resumo

-Xylosidases (EC 3.2.1.37) catalyze the hydrolysis of short xylooligosaccharides into xylose, which is an essential step in the complete depolymerization of xylan, the major hemicellulosic polysaccharide of plant cell walls, and has great biotechnological relevance for the production of lignocellulose-based biofuels and the paper industry. In this study, a GH43 -xylosidase identified from the bacterium Bacillus licheniformis (BlXylA) was cloned into the the pET-28a bacterial expression vector, recombinantly overexpressed in Escherichia coli BL21(DE3) cells and purified to homogeneity by metal-affinity and size-exclusion chromatography. The protein was crystallized in the presence of the organic solvent 2-methyl-2,4-pentanediol and a single crystal diffracted to 2.49 angstrom resolution. The X-ray diffraction data were indexed in the monoclinic space group C2, with unit-cell parameters a = 152.82, b = 41.9, c = 71.79 angstrom, = 91.7 degrees. Structural characterization of this enzyme will contribute to a better understanding of the structural requirements for xylooligosaccharide specificity within the GH43 family. (AU)

Processo FAPESP: 13/13309-0 - Estudos do comportamento funcional e estrutural de enzimas evolutivamente especializadas na degradação de biomassa vegetal com potenciais aplicações biotecnológicas
Beneficiário:Mário Tyago Murakami
Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Regular
Processo FAPESP: 13/10443-7 - Bioprospecção e construção de hemicelulases para a produção de xilose a partir de hidrolisado de licor de pentoses e sua utilização na produção de xilitol via fermentativa
Beneficiário:José Alberto Diogo
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Mestrado
Processo FAPESP: 14/07135-1 - EMU concedido no processo 2013/13309-0 - aquisição do sistema de eletroforese capilar com detector de fluorescência - Beckman Coulter
Beneficiário:Mário Tyago Murakami
Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Programa Equipamentos Multiusuários