| Texto completo | |
| Autor(es): |
Bruna Nicoleti Santana
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Elis Domingos Ferrari
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Alex Akira Nakamura
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Giane Serafim da Silva
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Marcelo Vasconcelos Meireles
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Número total de Autores: 5
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| Afiliação do(s) autor(es): | [1] Universidade Estadual Paulista. Faculdade de Medicina Veterinária - Brasil
[2] Universidade Estadual Paulista. Faculdade de Medicina Veterinária - Brasil
[3] Universidade Estadual Paulista. Faculdade de Medicina Veterinária - Brasil
[4] Instituto Biológico. Laboratório de Parasitologia Animal - Brasil
[5] Universidade Estadual Paulista. Faculdade de Medicina Veterinária - Brasil
Número total de Afiliações: 5
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| Tipo de documento: | Artigo Científico |
| Fonte: | Revista Brasileira de Parasitologia Veterinária; v. 31, n. 1 2022-03-21. |
| Resumo | |
Resumo O objetivo deste trabalho foi validar um protocolo de nested PCR em tempo real em um tubo (nPCR-TR-1T) seguida de sequenciamento genético para detectar e caracterizar as espécies e genótipos de Cryptosporidium em aves. Um total de 443 amostras de DNA genômico, extraído de amostras fecais de aves, foi analisado pela nPCR-TR-1T e pela nested PCR convencional. Pela nPCR-TR-1T, foi observada positividade para Cryptosporidium spp. de 20,3% (90/443), em contraste com a nested PCR convencional, que apresentou positividade de 8,1% (36/443). O teste de sensibilidade analítica mostrou que a nPCR-TR-1T detecta aproximadamente 0,5 oocisto (2 esporozoítos) por reação. A avaliação da especificidade analítica não revelou amplificação de microrganismos que comumente apresentam amplificação inespecífica com primers utilizados para o diagnóstico de Cryptosporidium spp. O cálculo da repetibilidade evidenciou o mesmo resultado em 27 de 30 amostras (90%). Em relação à reprodutibilidade da nPCR-TR-1T, foi observado o mesmo resultado em 80% (24/30) das amostras examinadas. Foi possível realizar o sequenciamento em todas as 90 amostras amplificadas pela nPCR-TR-1T, com identificação de C. baileyi, C. galli, C. meleagridis, C. proventriculi e Cryptosporidium genótipo I em aves. O sequenciamento dos fragmentos amplificados pela nested PCR convencional foi possível em 10/36 (27,8%) das amostras positivas. (AU) | |
| Processo FAPESP: | 18/06681-3 - Validação da PCR em tempo real associada a sequenciamento genético para detecção e caracterização de espécies e genótipos de Cryptosporidium em amostras fecais de aves e de mamíferos |
| Beneficiário: | Marcelo Vasconcelos Meireles |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Regular |
| Processo FAPESP: | 18/03791-2 - Validação da PCR em tempo real associada a sequenciamento genético para detecção e caracterização de espécies e genótipos de Cryptosporidium em amostras fecais de aves |
| Beneficiário: | Bruna Nicoleti Santana |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado |