Myosin Va interacts with the exosomal protein spermine synthase

Autor(es)

Dolce, Luciano G. ; Silva-Junior, Rui M. P. ; Assis, Leandro H. P. ; Nascimento, Andrey F. Z. ; Araujo, Jackeline S. ; Meschede, Ingrid P. ; Espreafico, Enilza M. ; de Giuseppe, Priscila O. ; Murakami, Mario T.

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: BIOSCIENCE REPORTS; v. 39, p. 11-pg., 2019-03-29.

Resumo

Myosin Va (MyoVa) is an actin-based molecular motor that plays key roles in the final stages of secretory pathways, including neurotransmitter release. Several studies have addressed how MyoVa coordinates the trafficking of secretory vesicles, but why this molecular motor is found in exosomes is still unclear. In this work, using a yeast two-hybrid screening system, we identified the direct interaction between the globular tail domain (GTD) of MyoVa and four protein components of exosomes: the WD repeat-containing protein 48 (WDR48), the cold shock domain-containing protein E1 (CSDE1), the tandem C2 domain-containing protein 1 (TC2N), and the enzyme spermine synthase (SMS). The interaction between the GTD of MyoVa and SMSwas further validated in vitro and displayed a Kd in the low micromolar range (3.5+-0.5 mu M). SMS localized together with MyoVa in cytoplasmic vesicles of breast cancer MCF-7 and neuroblastoma SH-SY5Y cell lines, known to produce exosomes. Moreover, MYO5A knockdown decreased the expression of SMS gene and rendered the distribution of SMS protein diffuse, supporting a role for MyoVa in SMS expression and targeting. (AU)

• Processo FAPESP: 14/00584-5 - Entendimento do papel da fosforilação do domínio de ligação a cargas (CBD) na regulação da função de miosinas não convencionais da Classe V
• Beneficiário: Luciano Graciani Dolce
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Processo FAPESP: 18/04017-9 - Caracterização genômica e funcional de potenciais lncRNAs restritos a melanoma (RMELs)
• Beneficiário: Enilza Maria Espreafico
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Processo FAPESP: 09/14257-8 - Estudos estruturais do domínio globular da miosina Va humana responsável pelo transporte intracelular de organelas e vesículas
• Beneficiário: Andrey Fabricio Ziem Nascimento
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Processo FAPESP: 14/03989-6 - Mecanismos fisiopatológicos e moleculares de tumorigênese: abordagem baseada em plataformas de sequenciamento em escala genômica (NGS - Next-Generation Sequencing)
• Beneficiário: Margaret de Castro
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Processo FAPESP: 14/09720-9 - Estudos do papel da fosforilação e da ligação de proteínas parceiras na regulação da função de miosinas V humanas
• Beneficiário: Mário Tyago Murakami
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Processo FAPESP: 11/20229-7 - Miosina-5A humana e o transporte intracelular de cargoes: estudos dos complexos de miosina-5A e proteínas adaptadoras
• Beneficiário: Leandro Henrique de Paula Assis
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Processo FAPESP: 04/08868-0 - Consolidação do Centro de Microscopia Funcional do Campus da USP/ Ribeirão Preto
• Beneficiário: Roy Edward Larson
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Programa Equipamentos Multiusuários
• Processo FAPESP: 16/10862-8 - Estudo do papel da miosina-Va nos processos da dinâmica mitocondrial e mitofagia
• Beneficiário: Jackeline Souza Araújo
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Processo FAPESP: 13/08135-2 - CTC - Centro de Terapia Celular
• Beneficiário: Dimas Tadeu Covas
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Centros de Pesquisa, Inovação e Difusão - CEPIDs