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(Referência obtida automaticamente do Web of Science, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores.)

A rational protocol for the successful crystallization of l-amino-acid oxidase from Bothrops atrox

Texto completo
Autor(es):
Alves, Raquel Melo [1] ; Feliciano, Patricia Rosa [2] ; Sampaio, Suely Vilela [1] ; Nonato, Maria Cristina [2]
Número total de Autores: 4
Afiliação do(s) autor(es):
[1] Univ Sao Paulo, FCFRP, Dept Anal Clin Toxicol & Bromatol, BR-14040903 Sao Paulo - Brazil
[2] Univ Sao Paulo, FCFRP, Lab Cristalog Prot, BR-14040903 Sao Paulo - Brazil
Número total de Afiliações: 2
Tipo de documento: Artigo Científico
Fonte: ACTA CRYSTALLOGRAPHICA SECTION F-STRUCTURAL BIOLOGY COMMUNICATIONS; v. 67, n. 4, p. 475-478, APR 2011.
Citações Web of Science: 2
Resumo

Despite the valuable contributions of robotics and high-throughput approaches to protein crystallization, the role of an experienced crystallographer in the evaluation and rationalization of a crystallization process is still crucial to obtaining crystals suitable for X-ray diffraction measurements. In this work, the difficult task of crystallizing the flavoenzyme l-amino-acid oxidase purified from Bothrops atrox snake venom was overcome by the development of a protocol that first required the identification of a non-amorphous precipitate as a promising crystallization condition followed by the implementation of a methodology that combined crystallization in the presence of oil and seeding techniques. Crystals were obtained and a complete data set was collected to 2.3 A resolution. The crystals belonged to space group P2(1), with unit-cell parameters a = 73.64, b = 123.92, c = 105.08 A, beta = 96.03 degrees. There were four protein subunits in the asymmetric unit, which gave a Matthews coefficient V (M) of 2.12 A3 Da-1, corresponding to 42% solvent content. The structure has been solved by molecular-replacement techniques. (AU)

Processo FAPESP: 05/54855-0 - Toxinas animais: estrutura, função e aplicações biotecnológicas
Beneficiário:Suely Vilela
Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Temático
Processo FAPESP: 07/51700-1 - Análise da estrutura tridimensional da L-aminoácido oxidase de Bothops atrox e suas interações in vitro e in vivo
Beneficiário:Raquel de Melo Alves Paiva
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Doutorado
Processo FAPESP: 09/10454-3 - Estudos da correlação entre estrutura e função da enzima fumarato hidratase em Leishmania major
Beneficiário:Patrícia Rosa Feliciano
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Doutorado