Identificação das proteínas interagentes de Yes-Associated Protein (YAP) em células epiteliais da glândula mamária expostas a membrana basal reconstituída

Resumo

A sinalização da matriz extracelular (MEC) é essencial para a determinação do destino e comportamento de células epiteliais na morfogênese e na biologia da glândula mamária. Entretanto, pouco é conhecido sobre os mecanismos moleculares que regulam esse processo. A via Hippo, uma cascata que participa da regulação de diversos comportamentos celulares, incluindo o tamanho de órgãos, parece ser uma importante candidata a mediadora dessa sinalização. Nosso laboratório explora a hipótese de que Hippo esteja envolvida em processos cruciais do desenvolvimento e biologia da glândula mamária e possa intermediar os sinais da MEC que regulam esses processos. Resultados preliminares do laboratório indicam que a arquitetura tecidual e a membrana basal, componente da MEC de epitélios e outros tecidos, influenciam a localização, concentração e atividade de YAP, uma proteína efetora da via Hippo, nas células epiteliais mamárias. Neste contexto, o objetivo desta proposta é identificar as proteínas que interagem com YAP nas células epiteliais da glândula mamária em resposta à membrana basal. Para atingir esse objetivo, utilizaremos a técnica de BioID (proximity-dependent bionin identification) seguida de análise por espectrometria de massas. A expectativa é que a identificação de parceiros moleculares de YAP em células epiteliais revele uma rede de interações que ajude a compreender os mecanismos da sinalização da MEC na morfogênese e homeostase da glândula mamária.