Neutralização da neurotoxicidade de oligômeros do peptídeo beta-amilóide pela expressão neuronal regulável do anticorpo de cadeia única conformacional NUsc1

Resumo

Os oligômeros solúveis do peptídeo Abeta (AbetaOs) são as principais neurotoxinas relacionadas ao déficit cognitivo na Doença de Alzheimer (DA). Com o aumento da expectativa de vida da população, e ausência de métodos diagnósticos pre-mortem e tratamento eficientes para a DA, anticorpos conformacionais específicos para AbetaOs são vistos como uma estratégia terapêutica promissora. No entanto, testes clínicos com IgG anti-Abeta resultaram em efeitos colaterais inflamatórios mediados pela interação da porção não variável Fc com os receptores Fcgama de micróglia, acarretando a ruptura da barreira hematoencefálica. Então, anticorpos conformacionais artificiais do tipo scFv, desprovidos de porção Fc, foram selecionados contra AbetaOs. Dentre eles, NUsc1, capaz de neutralizar a neurotoxicidade de AbetaOs relevantes na patogênese da DA em cultura primária de neurônios, aparece com destaque. Neste projeto, pretendemos estabelecer o potencial terapêutico de NUsc1 para a DA, avaliando se esse anticorpo é neuroprotetor contra AbetaOs quando expresso constitutivamente e secretado por células neuronais. Além disso, analisaremos a possibilidade de regulação da expressão gênica de NUsc1 por um sistema on/ off controlado exogenamente. Verificaremos a segurança de seu uso terapêutico ao analisar se NUsc1 gera efeitos adversos pró-inflamatórios mediados pela ativação de micróglia, e se o complexo NUsc1-AbetaO resultante é metabolizado via fagocitose microglial, um possível mecanismo de eliminação do complexo do SNC. Por fim, esperamos contribuir com o estudo da aplicabilidade de anticorpos de cadeia única para a imunoterapia na DA, e gerar um vetor para expressão constitutiva e regulável em células eucarióticas de scFv's relevantes a neuropatologias. (AU)