Supressão de acetona triplete por sorbatos alquilados, esterificados ou derivados peptídicos

Resumo

Supressão de acetona triplete por derivados de ácido sórbico capazes de inibir adimerização de pirimidinas do DNA de melanócitos no escuro.Compostos carbonílicos tripletes gerados in vivo podem iniciar reações tipicamentefotoquímicas na ausência de luz com perda ou ganho de funções celulares. Este é ocaso da dimerização de pirimidinas de DNA observada em melanócitos horas apósirradiação com UV (Brash, Douki, Bechara e colaboradores, Science 2015). Aexcitação eletrônica das bases do DNA foi alcançada por tripletes derivados daoxidação da melanina promovida por peroxinitrito endógeno. Este sistema serámimetizado utilizando tetrametildioxetano (TMD) preparado em laboratório como fontelimpa de acetona triplete, acompanhada pela emissão de luz amplificada por umagente fluorescente (DBAS, 9,10-dibromoantraceno-2-sufonato) e suprimida pordienos conjugados, especificamente, sorbatos (trans,trans-2,4-pentadienoatos).Como modelo enzimático, acetona triplete também será gerada pela oxidaçãoaeróbica de isobutanal catalisada por peroxidase de raiz forte (HRP, horseradishperoxidase). Espera-se que o exciplex triplete/dienoato deva se estabilizar viaisomerização cis,trans do dieno e permitir escolha do isômero mais abundante comomarcador da supressão em experimentos in vivo. O sorbato será então derivatizadopor esterificação com álcool de cadeia longa e com um cell penetrating peptide (CPP)para, no futuro, investigar possível facilitação da supressão de dímeros "escuros" depirimidinas (CPDs, cyclobutane pyrimidine dimers) em cultura de melanócitos pordienos. Entre outros métodos, o projeto requer a preparação de TMD e CPPs, SternVolmer plots em luminômetro e separação de isômeros cis,trans dos sorbatos porHPLC. O projeto pode corroborar uma conexão entre geração de CPDs de DNA naausência de carcinogênese em melanócitos.