Avaliação dos efeitos da terapia fotodinâmica com hipericina no tratamento da doença periodontal induzida em ratos

Resumo

O tratamento da doença periodontal visa a completa supressão da patogenia bacteriana e a redução dos sinais clínicos de inflamação. Diversos tratamentos tem sido propostos para eliminar os microorganismos presentes, dentre eles a terapia fotodinâmica (TFD). A Terapia Fotodinâmica se baseia na administração sistêmica ou tópica de um corante não-tóxico, fotossensível que estimulado por uma fonte de luz (laser ou LED - diodo emissor de luz), reage com o oxigênio presente nos tecidos produzindo espécies altamente reativas, como oxigênio singlete e radicais livres. A hipericina é um pigmento fotoativo natural presente em plantas herbáceas conhecidas como erva de São João (gênero Hypericum perforatum), apresentando dois picos de absorção no espectro verde-amarelo: 550nm e 590nm, sendo atualmente considerada o mais potente fotossensibilizador encontrado na natureza. O objetivo deste trabalho é avaliar, in vivo, as respostas teciduais do emprego da TFD utilizando hipericina no tratamento da doença periodontal induzida em ratos, através das seguintes avaliações: histológica e histométrica; radiográfica; imunohistoquímica para RANKL e TRAP e, PCR real time para VEGF, FGFb e TGF²e caracterização da resposta inflamatória por citometria de fluxo através da detecção dos antígenos de superfície CD45 (células inflamatórias), e perfil fenotípico de linfócitos (células T, B e NK). Uma parte da suspensão de células será permeabilizada e avaliada para a expressão de IL-10, TNF-alfa e interferon-gama como forma de caracterizar o perfil da resposta inflamatória como predominantemente Th1 ou Th2. No estudo serão utilizados 264 ratos, onde 7 animais serão utilizados para as análises histológica, histométrica e resposta inflamatória e 4 animais para avaliação com técnica de PCR real time. Todos os animais serão utilizados para avaliação radiográfica. Os ratos terão a doença periodontal induzida randomicamente nos primeiros molares inferiores. Após 7 dias as ligaduras serão removidas e os tratamentos aplicados em cada grupo: GI) Controle positivo da doença periodontal; GII) Raspagem; GIII) LED; GIV) Fotossensibilizador; GV) Raspagem + LED; GVI) Raspagem + Fotossensibilizador; GVII) Terapia fotodinâmica, GVIII) raspagem + TFD (RAR/TFD). Os animais serão avaliados aos 7, 15 e 30 dias após tratamento da doença. Após os períodos correspondentes os animais serão sacrificados com sobredose anestésica e realizados as análises radiográfica, histológica/métrica e resposta inflamatória. (AU)