Efeito do Tirosol sobre fatores de virulência de Candida albicans, Candida glabrata e Streptococcus mutans

Resumo

O presente trabalho tem por objetivo avaliar o efeito de diferentes concentrações de Tirosol na produção de enzimas hidrolíticas por Candida albicans e Candida glabrata, na produção de ácido láctico por Streptococcus mutans e na capacidade de formação de biofilmes simples e mistos das três espécies mencionadas. Primeiramente, de acordo com o método da microdiluição, será determinada a concentração inibitória mínima de Tirosol capaz de inibir o crescimento de cada cepa no estado planctônico. Na sequência, biofilmes simples e mistos das três espécies serão formados (durante 48 horas) na presença de diferentes concentrações de Tirosol sobre espécimes de resina acrílica e hidroxiapatita em placas de microtitulação de 24 poços. Posteriormente, a atividade enzimática (proteinase, fosfolipase e hemolítica) das espécies de Candida será determinada usando meios de cultura específicos para cada tipo de enzima hidrolítica, enquanto a produção de ácido láctico por S. mutans será avaliada de acordo com o Kit Clinpro Cario L-Pop. O efeito do Tirosol na capacidade de formação de biofilmes será quantificado por meio da contagem do número de células cultiváveis, biomassa total (ensaio de coloração com cristal violeta) e atividade metabólica das células. Ainda, será avaliado o efeito do Tirosol em biofilmes pré-formados através dos ensaios mencionados anteriormente e a microscopia eletrônica de varredura será utilizada para analisar a estrutura dos biofilmes após tratamento com Tirosol. Controles sem Tirosol serão incluídos em todas as análises e todos os testes serão realizados em triplicata em três ocasiões diferentes. Os dados serão submetidos ao teste de normalidade e, a seguir, será aplicada análise estatística adequada para cada resultado, com nível de significância de 5%.