Caracterização do metabolismo de lipídeos no desenvolvimento inicial de embriões bovinos produzidos in vitro

Resumo

Anualmente, mais de 800.000 embriões bovinos são transferidos para vacas receptoras, sendo um terço desse total produzidos em laboratório, onde oócitos são fecundados in vitro. Apesar destes números, os índices de blastocistos produzidos ainda permanecem baixos; em torno de 40% dos oócitos inicialmente cultivados chegam ao estádio de blastocisto, e os que chegam, muitas vezes, estão comprometidos em termos de qualidade e competência. Essa competência muitas vezes é avaliada pela morfologia embrionária, taxas de clivagem e blastocistos. Entretanto, com o advento de novas biotecnologias, tem-se tornado claro que a competência embrionária pode ser severamente comprometida sem alterações morfológicas perceptíveis, mas sim devido a diferenças metabólicas encontradas no início do desenvolvimento embrionário. Uma dessas alterações está no grande acúmulo lipídico nos embriões PIV que é associado com sua baixa capacidade de criopreservação e com menor potencial de desenvolvimento embrionário, podendo ser um indicativo de condições de cultivo inadequadas quando comparadas com o sistema in vivo. Assim, uma das potenciais vias a serem relacionadas com a viabilidade embrionária seria a via de síntese e metabolismo dos lipídeos. Com isso o objetivo desse trabalho é caracterizar em embriões bovinos de diferentes velocidades de desenvolvimento o padrão de consumo/produção de moléculas relacionadas ao metabolismo lipídico, buscando um possível biomarcador da viabilidade embrionária. Para isso embriões bovinos serão produzidos in vitro em sistemas de cultivo de microgotas individuais, classificados quanto a cinética de desenvolvimento e retirados para avaliação em diferentes fases do desenvolvimento inicial. Essas avaliações consistirão em quantificação de lipídeos totais (SUDAN BLACK B), caracterização de lipídeos por cromatografia gasosa associada a espectrometria de massa e expressão de genes relacionados ao metabolismo de lipídeos por PCR em tempo real.