Mecanismo de ação e regulação de uma fosfatase alcalina no processo de ossificação endocondral

• Processo: 94/00274-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 1994
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 1995
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Francisco de Assis Leone
• Beneficiário: Francisco de Assis Leone
• Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Matriz óssea Fosfatase alcalina Trifosfato de adenosina Metaloenzimas Fluorescência Cromatografia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Atp | Cromatografia Hidrofobica | Fluorescencia | Fosfatase Alcalina | Matriz Ossea | Metaloenzima

Resumo

A fosfatase alcalina de placa óssea é uma metaloenzima multifuncional que pode existir em uma forma solúvel (SF) ou associada à membrana. A forma solúvel já foi purificada e caracterizada parcialmente. No segundo caso, além da forma ancorada pelo fosfatidil inositol (PIF) existe uma outra forma, com atividade ATPase e pirofosfatase, que está intrinsicamente ligada à membrana (MIF). A forma ancorada apresenta propriedades similares à da solúvel. Assim, os principais objetivos do projeto são: 1) Terminar a caracterização da forma solúvel; 2) Solubilizar, purificar e caracterizar a forma MIF; 3) Estudar detalhadamente a hidrólise do ATP e caracterizar o sítio de hidrólise do ATP através de binding direto, usando técnicas de fluorescência. (AU)