Resumo
A coccidiose é uma das enfermidades de maior importância econômica para a indústria avícola, com prejuízo global anual estimado em mais de 3 bilhões de dólares. Sete espécies de Eimeria infectam a galinha doméstica: E. acervulina, E. brunetti, E. mitis, E. maxima, E. necatrix, E. praecox e E. tenella. Porém, recentemente foi sugerida a classificação de três novas espécies, E. lata, E. nagambie e E. zaria. No Brasil, já foram diagnosticas as 10 espécies de Eimeria, porém há poucas informações relacionadas às infecções naturais ou experimentais e à sensibilidade a anticoccidianos de E. lata, E. nagambie e E. zaria; outrossim, não há nenhuma informação sobre o genoma completo das dez espécies de Eimeria isoladas em território nacional. Portanto, este trabalho tem como objetivos: 1) obter isolados puros das 10 espécies de Eimeria da galinha doméstica e realizar o sequenciamento completo do genoma dessas espécies; 2) em relação a E. lata, E. nagambie e E. zaria, serão realizadas a análise da sensibilidade a drogas anticoccidianas e infecções experimentais em galinhas domésticas. Os isolados de Eimeria spp. serão provenientes de amostras contendo oocistos de diversas espécies de Eimeria obtidos de criações alternativas nos municípios do interior de São Paulo. Para obtenção dos isolados puros de cada espécie serão usadas características biológicas, como o período pré-patente, análise morfológica e morfométrica dos oocistos e ausência de imunidade cruzada entre diferentes espécies. Os oocistos selecionados de cada espécie serão isolados por micromanipulação e propagados em aves. A confirmação da presença da pureza de cada espécie nas amostras será determinada com o uso de PCRs espécie-específicas. Os oocistos puros de cada espécie serão usados para realização de infecções experimentais e extração de DNA para a análise genômica. A análise da sensibilidade a drogas anticoccidianas usadas com mais frequência na indústria avícola será realizada por inoculação em frangos de corte, usando como critérios para determinação da sensibilidade aos anticoccidianos a análise do ganho de peso e o número de oocistos eliminados pelas aves inoculadas. As análises dos períodos pré-patente e patente, da fecundidade, tropismo tecidual, e lesões macroscópicas e microscópicas será realizada após infecção experimental com cada espécie. A análise do genoma completo de cada espécie será realizada por duas técnicas: 1) análise de short reads, usando a tecnologia Illumina; 2) análise de long reads, usando a tecnologia PacBio. (AU)
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