Estabelecimento de protocolos de expansão da linhagem Sf9 e propagação de baculovírus recombinantes em frascos Erlenmeyer

• Processo: 25/11444-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2025
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2026
• Área do conhecimento: Engenharias - Engenharia Química
• Pesquisador responsável: Eutimio Gustavo Fernández Núñez
• Beneficiário: Eutimio Gustavo Fernández Núñez
• Instituição Sede: Escola de Artes, Ciências e Humanidades (EACH). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Município da Instituição Sede: São Paulo
• Vinculado ao auxílio: 22/02713-3 - Estabelecimento de bioprocessos escalonáveis para produção de partículas semelhantes a vírus, AP.PNGP.PI
• Bolsa(s) vinculada(s): 25/22427-3 - Estabelecimento de protocolos de expansão da linhagem Sf9 e propagação de baculovírus recombinantes em frascos Erlenmeyer, BP.IC
• Assunto(s): Baculoviridae Bioprocessos Transferência de oxigênio
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: baculovirus | bioprocessos | Células de inseto Sf9 | frasco Erlenmeyer | transferência de oxigênio | Bioprocessos farmacêuticos

Resumo

As células de inseto se tornaram objeto de estudo durante o século XX com foco no desenvolvimento de biopesticidas e proteínas recombinantes. Devido a suas características favoráveis para a produção em larga escala, algumas linhagens de células de inseto assumiram um papel importante na indústria, sendo utilizadas para a produção de vetores para terapias gênicas, enzimas, peptídeos e vacinas, como é o caso da linhagem Sf9. O sistema baculovírus/célula de inseto (IC-BEVS) é um método que utiliza baculovírus recombinantes para a infecção das células de modo a produzir partículas virais e tem sido utilizado principalmente para a produção de vacinas baseadas em partículas semelhantes a vírus. Para que o IC-BEVS apresente resultados favoráveis em larga escala é preciso compreender o impacto e otimizar desde a escala de bancada uma série de parâmetros críticos relacionados ao crescimento e metabolismo celular que afetam a expansão de células de inseto assim como a propagação de baculovírus recombinantes, como a densidade celular, concentração de nutrientes e metabolitos, multiplicidade de infecção, tempo de infecção, tempo de coleta e a concentração de oxigênio dissolvido. Diferente do que ocorre em biorreatores, alguns desses parâmetros podem ser difíceis de controlar em cultivos em frascos de vidro como os frascos Erlenmeyer, um sistema com baixo controle de parâmetros, comumente utilizado em ensaios em nível de bancada para a propagação celular e viral. Assim, o presente estudo propõe estabelecer protocolos para a propagação de células Sf9 e baculovírus recombinantes em cultivos realizados em frascos Erlenmeyer utilizando meio quimicamente definido em diferentes relações volume de trabalho-volume nominal, através da avaliação da produtividade celular, metabolismo e do título viral. Os resultados obtidos por este projeto auxiliarão na otimização de cultivos celulares em nível de bancada, melhorando os protocolos existentes em termos de tempo, custos e minimização de riscos de falhas nos procedimentos experimentais. (AU)