Detecção do herpesvírus bovino 1 (BHV-1) em sêmen bovino através de reação em cadeia pela polimerase (PCR)

• Processo: 00/08122-8
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2002
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Medicina Veterinária Preventiva
• Pesquisador responsável: Leonardo José Richtzenhain
• Beneficiário: Leonardo José Richtzenhain
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Herpesviridae Herpesvirus bovino 1 Sêmen animal Inseminação artificial animal Técnicas e procedimentos diagnósticos Reação em cadeia por polimerase (PCR)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Diagnostico Direto | Herpesvirus Bovino Tipo 1 | Semen

Resumo

O Herpesvírus Bovino tipo-1 (HVB-1) pertence à família Herpesviridae, subfamília Alphaherpesvirinae, gênero Varicellovirus (ROIZMAN et aI., 1995) e é o agente etiológico da Rinotraqueíte Infecciosa Bovina (IBR). Os bovinos infectados pelo HVB-1 tornam-se portadores latentes e potenciais eliminadores do vírus. A transmissão de HVB-1 pela inseminação artificial (IA) pode causar sérias complicações reprodutivas em vacas inseminadas, como aborto, infertilidade, endometrite e absorção embrionária. A técnica padrão para diagnóstico do vírus em amostras de sêmen é o isolamento viral, que apresenta uma série de desvantagens. Entre elas pode-se elencar: a complexidade de execução e morosidade da obtenção de resultados conclusivos, levando até três semanas para obte-los; a citotoxicidade de algumas amostras de sêmen inviabilizando seu ensaio; a perda de sensibilidade decorrente da eventual inativação do vírus presente no sêmen. O objetivo deste trabalho é padronizar e avaliar a reação de PCR para a detecção do HVB-1 em sêmen bovino, empregando os primers desenhados em nosso laboratório (D' ANGELO 1999) dirigidos para o gene gB. Os resultados obtidos com a técnica de PCR serão comparados com aqueles obtidos com o isolamento viral e pesquisa de anticorpos séricos pela técnica da soroneutralização. A metodologia de PCR desenvolvida será implantada no diagnóstico de rotina do HVB-1 em sêmen de bovinos, no Instituto Biológico de São Paulo. (AU)