Transgênese sitio-especifica mediada por integrases na geração de embriões bovinos geneticamente modificados

• Processo: 12/50726-5
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2015
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Acordo de Cooperação: CNPq - Programa Primeiros Projetos
• Pesquisador responsável: Marcella Pecora Milazzotto
• Beneficiário: Marcella Pecora Milazzotto
• Instituição Sede: Centro de Ciências Naturais e Humanas (CCNH). Universidade Federal do ABC (UFABC). Ministério da Educação (Brasil). Santo André , SP, Brasil
• Assunto(s): Animais geneticamente modificados Bovinos Mutagênese sítio-dirigida Integrases Fibroblastos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bovino | Fibroblasto | Transgenia Sitio Especifica

Resumo

A injeção de DNA exógeno em pró-núcleo de zigotos tem sido a estratégia mais usada nos últimos 30 anos para a geração de animais geneticamente modificados. Apesar de eficiente, limitações da técnica ainda são encontradas, em especial no que se refere a espécies que apresentam dificuldade na visualização do pró-núcleo, sitio de integração, manutenção da integridade da molécula introduzida e a quantidade de copias inseridas que não pode ser controlada. A inserção do DNA exógeno de forma aleatória no genoma hospedeiro pode interromper a função de genes endógenos ou mesmo promover o silenciamento do gene inserido. Neste sentido, estudos voltam-se hoje para o desenvolvimento de estratégias que promovam a inserção direcionada do DNA exógeno. Diversas estratégias tem sendo desenvolvidas com essa finalidade em particular em espécies usadas para modelos de estudos de doenças. Dentre essas estratégias podemos citar o uso de integrases e recombinases que medeiam a inserção do transgene em sítios específicos no genoma. Apesar de bastante utilizadas, essas enzimas agem em função de seqüências de DNA específicas dos organismos que as produzem, sítios estes muitas vezes inexistentes em organismos de interesse para a indústria farmacêutica e agropecuária. Neste sentido, este projeto tem como objetivo a geração de uma linhagem de fibroblastos bovinos com a introdução estável de um vetor com múltiplos sítios de recombinação/ integração. Esta linhagem poderá ser posteriormente usada para a geração de um animal com a presença destes sítios o que permitirá a geração de bovinos geneticamente modificados de maneira mais eficiente e de maneira sítio-dirigida, contribuindo para o aprimoramento da geração de animais transgênicos com características de interesse econômico. (AU)