Estudo da expressão gênica e análise ultra-estrutural de embriões e tecido materno de cadelas no período peri-implantação

• Processo: 09/50718-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2009
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Maria Denise Lopes
• Beneficiário: Ana Augusta Pagnano Derussi
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Gravidez Prenhez Cadelas Embrião de animal Implantação do embrião Expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cadelas | Embrioes | Genes | Gestacao | Sinalizacao

Resumo

O estabelecimento e manutenção da gestação são resultantes de uma série de interações entre o concepto, tecido materno e corpo lúteo. Na espécie canina o conhecimento da expressão gênica de fatores relacionados à presença dos embriões e a interação materno-fetal responsáveis pelo estabelecimento da gestação é ainda pouco esclarecida. Este trabalho tem como objetivo determinar a expressão de genes candidatos relacionados ao reconhecimento materno da gestação em cadelas, avaliar o perfil protéico em lavados uterinos e tubáricos de fêmeas gestantes e não, gestantes e realizar uma análise ultra-estrutural descritiva de embriões e tecido uterino materno no período peri-implantação. Serão utilizadas 20 fêmeas divididas em 2 grupos - GRUPO I (Experimental) - constituídos por 1.5 cadelas que serão inseminadas nos dias D4 e D6 da onda pré-ovulatória de LH, por via vaginal, com sêmen fresco. Esse grupo será subdividido em Grupo IA - 05 fêmeas submetidas à ovariohisterectomia oito dias após a primeira inseminação; Grupo IB - 05 cadelas em que a ovariohisterectomia será realizada doze dias após a primeira inseminação e Grupo IC -05 cadelas submetidas à ovariohisterectomia 21 dias após a primeira inseminação. O GRUPO II (Controle)- formado por 05 cadelas, não inseminadas, que serão ovariohisterectomizadas 15 dias após a onda pré-ovulatória de LH. Para a determinação da expressão dos genes candidatos - interferon tau (IFN-t), osteopontinas (OPN), fator inibidor de leucemia (LIF) e dos receptores de progesterona (PR), estrógeno (ER-ß e ER-α), oxitocina (OTR) e do receptor do fator inibidor de leucemia (LlFr) será utilizada a técnica de RT-PCR em tecido uterino materno e embriões das cadelas do subgrupo IA, IB e IC e apenas em tecido uterino das fêmeas do GRUPO II. Para isso, embriões, amostras de endométrio e tubas uterinas serão congeladas a -80ºC e posteriormente processados. Para a caracterização eletroforética das proteínas do lavado uterino e tubárico de ambos os grupos será utilizada a técnica de eletroforese bi-dimensional, a fim de determinar o peso molecular e a IOD (Densidade Óptica Integrada) para cada banda de cada amostra em gel. A avaliação ultra-estrutural dos embriões, útero e tubas uterinas será efetuada baseando-se interpretação das eletromicrografias obtidas após o preparo e processamento adequado das amostras obtidas tanto do grupo controle quanto do grupo experimental. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DERUSSI, A. A. P.; DE SOUZA, R. W. A.; VOLPATO, R.; GUAITOLINI, C. R. F.; ACKERMANN, C. L.; TAFFAREL, M. O.; CARDOSO, G. S.; DAL-PAI-SILVA, M.; LOPES, M. D.. Progesterone (PR), Oestrogen (ER-alpha and ER-beta) and Oxytocin (OTR) Gene Expression in the Oviduct and Uterus of Pregnant and Non-pregnant Bitches. REPRODUCTION IN DOMESTIC ANIMALS, v. 47, p. 3-pg., 2012-12-01. (09/50718-0)

DERUSSI, A. A. P.; DE SOUZA, R. W. A.; VOLPATO, R.; GUAITOLINI, C. R. F.; ACKERMANN, C. L.; TAFFAREL, M. O.; CARDOSO, G. S.; DAL-PAI-SILVA, M.; LOPES, M. D.. Progesterone (PR), Oestrogen (ER-alpha and ER-beta) and Oxytocin (OTR) Gene Expression in the Oviduct and Uterus of Pregnant and Non-pregnant Bitches. REPRODUCTION IN DOMESTIC ANIMALS, v. 47, n. 6, SI, p. 197-199, DEC 2012. (09/50718-0)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

DERUSSI, Ana Augusta Pagnano. Expressão gênica, caracterização eletroforética e análise ultraestrutural de embriões e tecido materno de cadelas gestantes e não gestantes. 2012. Tese de Doutorado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. Botucatu Botucatu.