| Processo: | 09/12360-6 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Mestrado |
| Data de Início da vigência: | 01 de agosto de 2010 |
| Data de Término da vigência: | 29 de fevereiro de 2012 |
| Área de conhecimento: | Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal |
| Pesquisador responsável: | Wilter Ricardo Russiano Vicente |
| Beneficiário: | Paula Andressa Pennacchi Savi |
| Instituição Sede: | Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Vitamina E Radicais livres Epididimo Cães Espermatozoides |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | cão | epidídimo | espermatozóides | N-acetil-cisteína | radicais livres | vitamina E | Preservação de espermatozóides |
Resumo O objetivo do presente estudo será testar se a suplementação do meio diluente com dois antioxidantes, utilizando-os em separado ou associados, em diferentes concentrações, possibilita ou não a melhora na qualidade de preservação das células espermáticas nos processos de refrigeração e congelação. Utilizar-se-ão 21 unidades experimentais (UE), constituídas, cada uma delas, por um "pool" de recuperado espermático de três cães hígidos (totalizando 63 animais), submetidos à orquiectomia eletiva. Estas serão divididas em três grupos constituídos por sete UE cada. O grupo I (GI), o grupo II (GII) e o grupo III (GIII) que terão a adição de antioxidantes nas concentrações de 0,5mM, 2,5mM e 5mM, respectivamente. Para cada grupo far-se-ão em um primeiro momento a avaliação dos espermatozóides a fresco, quanto à motilidade, vigor, teste vital e morfologia espermática utilizando a coloração descrita por POPE et al. (1991). Ainda, a integridade de membrana será avaliada por meio do teste hiposmótico e coloração por sondas fluorescentes, serão também mensurados as quantidades de espécies reativas de oxigênio (ROS), a atividade mitocondrial pelo teste de atividade citoquímica (DAB) e será realizado o teste de termo resistência (TTR). Ato continuo, cada UE será dividida em quatro alíquotas de igual volume e estas serão centrifugadas; o sobrenadante desprezado e o concentrado de espermatozóides ressuspendido em meio diluente TRIS (PEÑA E LINDE-FORSBERG, 2000), modificado por MARTINS (2005), acrescido de Vitamina E, N-acetil-cisteína ou a associação de ambas. Cada alíquota será dividida em duas, uma para refrigeração (por 48 horas) e outra para congelação. Todas as diluições serão novamente avaliadas a fresco, após os períodos de refrigeração e descongelação. Os resultados obtidos serão avaliados por meio de análise de variância para médias repetidas com posterior avaliação pelo teste Tukey (p<0,05). | |
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