Avaliação Bioquímica e Histoquantitativa da Nefropatia diabética e do Pâncreas em ratos tratados com exercício físico e insulinoterapia

• Processo: 10/10737-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2010
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2011
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
• Pesquisador responsável: Antonio Augusto Coppi Maciel Ribeiro
• Beneficiário: Ana Paula Frigo Moura
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 08/54895-0 - Avaliacao bioquimica e histoquantativa da nefropatia diabetica e do pancreas em ratos tratados com exercicio fisico e insulinoterapia., AP.R
• Assunto(s): Nefrologia Nefropatias diabéticas Diabetes mellitus Ratos Estereologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: diabetes mellitus | Estereologia | nefropatia diabética | Ratos | Streptozotocina | Nefrologia

Resumo

O Diabetes mellitus (DM) é uma disfunção metabólica complexa causada pela deficiência das ilhotas pancreáticas em secretar insulina ou pela redução da eficácia da ação da insulina sobre os tecidos-alvos. A Nefropatia Diabética (ND) é a maior causa de morbidade e mortalidade em pacientes com diabetes do tipo 1, afetando um terço destes. Desta forma, o presente estudo objetiva realizar uma avaliação bioquímica e histoquantitativa dos componentes macro e microestruturais do rim e do pâncreas de ratos diabéticos do tipo 1 submetidos a três tipos de tratamento: exercício físico, insulina e exercício físico associado à administração de insulina. Serão utilizados 60 ratos machos da linhagem Wistar, com idade de 60 dias e peso corporal médio de 250 gramas. Um estudo piloto será conduzido com dois grupos de dez animais: Grupo controle "sham" e Grupo diabético, para a padronização do método de indução e da dose de estreptozotocina necessária para indução do DM. Após o estudo piloto, o delineamento experimental será completado com cinco grupos de oito animais assim denominados: Grupo I: Animais controle "sham"; Grupo II: Animais diabéticos não-tratados; Grupo III: Animais diabéticos e tratados com exercício físico; Grupo IV: Animais diabéticos e tratados com insulina e Grupo V: Animais diabéticos e tratados concomitantemente com exercício físico e insulina. Serão colhidas amostras de sangue e de urina de todos os animais no final da 10ª semana de tratamento para a realização de testes laboratoriais visando obter o perfil bioquímico dos mesmos. Os seguintes parâmetros serão analisados: glicose sérica, insulina sérica, peptídeo C, IGF-1, perfil lipídico (triglicérides, colesterol total, colesterol fracionado), albumina sérica e albuminúria. Será realizado também estudo hemogasométrico para mensuração da pressão arterial diastólica (PAD), pressão arterial sistólica (PAS), pressão arterial média (PAM). Ao final da décima semana, os animais serão ortotanasiados, sendo os rins e os seus pâncreas dissecados e isolados. Utilizando-se métodos microscópicos estereológicos serão estimados os seguintes parâmetros: 1- Rim: volume renal, número total de glomérulos, densidade de volume glomerular e volume glomerular total, volume médio do glomérulo, densidade de comprimento e comprimento total de capilares e túbulos renais proximais, densidade de superfície e área de superfície total de capilares e túbulos renais proximais, número total de células tubulares renais proximais positivas para ECA (Enzima Conversora de Angiotensina), número total de células tubulares renais proximais positivas para angiotensina 1-7 (Ang 1-7) e angiotensina II (Ang II); 2- Pâncreas: número total e volume das células beta (imunorreativas à insulina) das ilhotas pancreáticas. Adicionalmente a cromatografia líquida de alta performance será utilizada para a dosagem de angiotensina 1-7 (Ang 1-7), angiotensina I (Ang I) e angiotensina II (Ang II).