Estudo comparativo do perfil hormonal, da foliculogênese, qualidade oocitária e competência meiótica in vitro de oócitos de fêmeas caninas em três diferentes períodos da fase do anestro (início, meio e fim).

• Processo: 11/07446-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2011
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Wilter Ricardo Russiano Vicente
• Beneficiário: Eliandra Antonia Pires Buttler
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
• Assunto(s): Maturação in vitro Hormônios Anestro Biotecnologia da reprodução
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Anestro | foliculogênese | Hormônio | maturação in vitro | Morfologia oocitária | Oócito canino | Biotecnologia da Reprodução

Resumo

O uso de técnicas de reprodução assistida em canídeos tem como principal objetivo a preservação do genoma dos canídeos selvagens ameaçados em extinção. Entretanto, a baixa competência meiótica dos oócitos caninos quando submetidos a cultivos in vitro tem dificultado o desenvolvimento de biotecnologias reprodutivas nesta espécie. Segundo pesquisadores, a baixa eficiência da MIV pode ser atribuída ao reduzido conhecimento sobre os eventos reprodutivos da cadela e a peculiaridades de sua fisiologia reprodutiva. Deste modo, o objetivo do estudo será ampliar o conhecimento sobre os eventos reprodutivos que ocorrem durante o anestro, avaliando comparativamente o perfil hormonal, o desenvolvimento folicular, a qualidade oocitária e a competência meiótica de oócitos de fêmeas caninas em três diferentes períodos do anestro, para verificar se ao longo desta fase há um período em que os oócitos apresentam melhor qualidade e maior competência meiótica. Quinze cadelas em anestro, com idade entre 1 a 7 anos serão agrupadas em três grupos: A1(início do anestro), A2(meio do anestro) e A3(final do anestro). Previamente a ovariohisterectomia (OHE) será realizado coleta de sangue para dosagem de FSH, LH, IGF e estradiol para caracterização do perfil hormonal. Após a OHE, os ovários obtidos serão divididos em 2 partes, sendo uma parte para análise histológica do tecido ovariano e outra parte para obtenção dos oócitos. Os oócitos obtidos serão cultivados por 72h em 5 meios de maturação: Meio I (TCM199, FSH e IGF por 48h e nas 24h adicionais TCM199, hCG, P4 e E2), Meio II (TCM199 e FSH por 48h e nas 24h adicionais TCM199, hCG, P4 e E2), Meio III (TCM199, FSH, IGF, hCG, P4 e E2 durante 72h), Meio IV (TCM199, FSH, hCG, P4 e E2 durante 72h), Meio V (TCM199 por 48h e nas 24h adicionais TCM199, hCG, P4 e E2). Os oócitos serão avaliados ultra-estruturalmente antes e após 72h de cultivo, através dos métodos de microscopia eletrônica de transmissão e varredura e pelo método de coloração com Lucifer Yellow.