Comparação entre próteses plásticas biliares com e sem aplicação de nanopartículas de prata: estudo in vitro da formação de biofilme intraluminal

• Processo: 12/22004-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2014
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Cirurgia
• Pesquisador responsável: Everson Luiz de Almeida Artifon
• Beneficiário: Kaie Fernandes
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Endoscopia Próteses e implantes Nanopartículas de prata Análise de variância Técnicas in vitro Técnicas microbiológicas Microscopia eletrônica de varredura
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: próteses plásticas biliares nanopartículas prata biofilme bacteriano | Endoscopia

Resumo

A inserção de próteses biliares por via endoscópica ou percutânea tem sido utilizada desde os anos 70 com o objetivo de efetivar a drenagem nas doenças obstrutivas malignas das vias biliares, bem como nas estenoses benignas. Contudo, a duração da patência dessa prótese está limitada pela obstrução progressiva de sua luz. Essa é considerada a maior complicação das próteses biliares, ocorrendo em um número significante de casos (10 a 30%) e está associada com recorrência da icterícia com ou sem colangite, necessitando remoção e reposição de nova prótese, o que acarreta aumento dos índices de morbidade, além de custos adicionais para o sistema de saúde. Vários fatores estão envolvidos na oclusão das endopróteses biliares tais como a formação de biofilme bacteriano aderente em seu lúmen. Desta maneira diversas estratégias já foram propostas com o objetivo de eliminá-lo, para postergar o período de oclusão da prótese e diminuir o risco de infecção das vias biliares. A partir de avanços tecnológicos que permitiram redução da prata a escala de nanopartículas e a integração de sua valiosa ação antimicrobiana em um número maior de materiais tem se aberto uma nova perspectiva para a produção de próteses bilares, já que a prata é reconhecida por suas propriedades antimicrobianas. Assim o objetivo desse estudo é analisar os efeitos das nanoparticulas de prata aplicadas em próteses biliares sobre a formação de biofilme, com o objetivo de impedir ou postergar a sua obstrução e, consequentemente, a infecção da via biliar, bem como desenvolvimento do produto e realização de testes in vitro. Serão comparadas próteses biliares plásticas com e sem modificação de sua superfície com a utilização de nanopartículas de prata. Serão utilizados meios de culturas específicos para cada bactéria testada enriquecidos com bile animal (suínos). A bile utilizada será obtida por punção da vesícula biliar de forma estéril, de suínos provenientes do biotério e que sejam submetidos a procedimentos cirúrgicos das vias biliares, que envolvam colecistectomia, no laboratório de Técnica Cirúrgica e Cirurgia Experimental da Universidade de São Paulo. Serão utilizadas cepas de organismos referidos como espécies mínimas que devem ser testadas para testes de controle de qualidade (National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS), fornecidas pela ATCC - American Type Culture Collection: Enterococcus faecalis ATCC® 29212 ; Escherichia coli ATCC® 25922; Escherichia coli ATCC® 35218; Pseudomonas aeruginosa ATCC® 27853 ; Staphylococcus aureus ATCC® 25923; Staphylococcus aureus ATCC® 43300.A seguir, novos seguimentos de próteses, com e sem nanopartículas de prata, previamente esterelizadas, serão montadas em um recipiente fechado onde serão banhadas com bile animal (suínos), infectadas com E. coli e/ou Enterococos, durante 7 dias. A cada dia, 3 segmentos de próteses e amostras da bile serão removidos e avaliados microbiologicamente para determinar a contagem de bactérias planctônicas (não aderentes) e avaliar a aderência microbiana. Para tal, os segmentos de próteses removidos serão lavados em solução salina estéril, para remoção das bactérias livres (planctônicas), e a seguir raspados com uma lâmina estéril. O material raspado e os segmentos de próteses serão suspensos em solução salina estéril e centrifugados em baixa velocidade por 5 minutos. Uma alíquota dessa solução será retirada para análise microbiológica e contagem de colônias. Serão avaliados segmentos de próteses com microscopia eletrônica de varredura, com fotografias das imagens, para confirmar a presença de aderência bacteriana e formação de biofilme. As variáveis particularizadas aos dados técnicos e anatomopatológicos serão analisados como preditores isolados e comparando cada grupo entre si. A variância e significância estatística será apresentada em razão absoluta. Todos os dados obtidos serão armazenados em sistema SPSS.(AU)