Quantificação de nucleosídeos modificados em amostras in vitro e in vivo de Câncer de pâncreas por ce-uv e lc-ms: validação de métodos bioanalíticos

• Processo: 13/13084-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2013
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Exatas e da Terra - Química - Química Analítica
• Pesquisador responsável: Ana Valéria Colnaghi Simionato
• Beneficiário: Mariana de Oliveira Silva
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Neoplasias pancreáticas Eletroforese capilar Biomarcadores Validação In vivo Nucleosídeos Métodos bioanalíticos Técnicas in vitro Cromatografia líquida
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: biomarcadores | câncer | cromatografia liquida | Eletroforese Capilar | validação | bioanalítica

Resumo

O câncer é uma neoplasia maligna responsável pela morte de 7,6 milhões de pessoas em 2008 no mundo. Sua incidência vem crescendo em todo mundo e as previsões apresentam números alarmantes (13,1 milhões de mortes em 2030). Mais da metade dos tipos de câncer podem ser curados quando o diagnóstico é precoce, inclusive o de pâncreas, através de cirurgia. Esta patologia de base apresenta um índice de mortalidade alto, pois além da sua agressividade, não apresenta sintomas facilmente identificados antes de atingir um estágio avançado, normalmente quando já há metástase. A falta de um método não invasivo para o diagnóstico no início da doença demonstra a importância da investigação de biomarcadores tumorais de pâncreas.A literatura científica mostra que a concentração de nucleosídeos modificados nos fluídos biológicos de indivíduos com câncer é maior que em indivíduos sadios, sendo então potenciais biomarcadores tumorais. Neste projeto serão utilizados métodos eletroforéticos e cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas em tandem (LC-MS/MS) para quantificar nucleosídeos modificados em soro e urina de pacientes com câncer de pâncreas e saudáveis. O sobrenadante proveniente das amostras in vitro obtidas a partir das linhagens celulares neoplásicas de adenocarcinoma de pâncreas (Panc-1) e a linha celular primária de fibroblastos de crianças de três anos (3Y-P1), consideradas como células saudáveis, serão analisadas pelos métodos desenvolvidos e validados para fins comparativos com as amostras in vivo.Será realizada a otimização do método cromatográfico, já que o método eletroforético já foi desenvolvido no grupo de pesquisa, e a validação de ambos. Desta forma será possível analisar a presença de determinados nucleosídeos como possíveis biomarcadores tumorais de pâncreas, auxiliando o diagnóstico dessa patologia de base através da corroboração com os exames feitos rotineiramente em laboratórios de análises clínicas, onde são realizados imunoensaios para quantificação do antígeno carboidrato 19-9 (CA19-9), permitindo um diagnóstico mais confiável e precoce, o que aumentaria a taxa de sobrevida do paciente.