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Cultura gamética em laranjeiras doces [Citrus sinensis (L.) Osbeck.]

Processo: 13/15637-4
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Doutorado
Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2013
Data de Término da vigência: 30 de junho de 2017
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Vegetal
Pesquisador responsável:Rodrigo Rocha Latado
Beneficiário:Karina Salomão
Instituição Sede: Instituto Agronômico (IAC). Agência Paulista de Tecnologia dos Agronegócios (APTA). Secretaria de Agricultura e Abastecimento (São Paulo - Estado). Campinas , SP, Brasil
Assunto(s):Citrus sinensis   Biotecnologia vegetal   Cultura de tecidos
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:antera | Citrus sinensis | cultura de tecidos | duplo-haplóide | haplóide | Biotecnologia Vegetal

Resumo

A obtenção de linhagens completamente homozigóticas em citros é complexa e demorada, pois as plantas cítricas apresentam algumas dificuldades para o melhoramento tradicional, baseado na realização de cruzamentos controlados, tais como: período juvenil longo, poliembrionia nas sementes, alta heterozigosidade e presença de auto-incompatibilidade em muitas espécies. Uma alternativa para maior rapidez na obtenção dessas linhagens pode ser por meio da produção de plantas haplóides, seguida de diploidização natural ou induzida, dando origem a plantas completamente homozigóticas em apenas um ciclo. As técnicas mais utilizadas para a obtenção de plantas haplóides e/ou duplo-haplóides descritas na literatura são a cultura de anteras, cultura de micrósporos isolados e a partenogênese in situ. Em relação a cultura de anteras e de micrósporos isolados, os fatores que mais afetam essas técnicas são: genótipos, pré-tratamentos, estágio de desenvolvimento do micrósporo e composição dos meios de cultivo. Para a técnica da partenogênese in situ também já são conhecidos os efeitos do genótipo e das doses de radiação utilizadas para inativação do grão de pólen. Os objetivos deste projeto são o desenvolvimento de protocolos de cultura de anteras, cultura de micrósporos isolados e partenogênese in situ de laranjeiras doces visando a produção de plantas haplóides e duplo-haplóides. Para isso estão sendo propostos vários experimentos, utilizando as três técnicas. Todas as plantas obtidas terão a sua ploidia determinada por citometria de fluxo em busca de plantas haplóides, sendo que, as plantas regeneradas serão avaliadas com uso de marcadores moleculares para determinação da origem gamética, zigótica ou somática. No caso da regeneração de plantas haplóides, essas terão o seu número cromossômico duplicado com uso de colchicina, resultando em plantas duplo-haplóides.

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