Aplicação da biofotônica no estudo das interações dos alcalóides isomoschatolina e palmatina com carreadores de fármacos e correlação com seus efeitos biológicos

• Processo: 14/09980-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 18 de agosto de 2014
• Data de Término da vigência: 17 de agosto de 2015
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia - Farmacognosia
• Pesquisador responsável: Marcos José Salvador
• Beneficiário: Caroline Caramano de Lourenço
• Supervisor: Stéphanie Bonneau
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Université Pierre et Marie Curie (Paris 6), França
• Vinculado à bolsa: 11/18315-2 - ESTUDO QUÍMICO, BIOLÓGICO E BIOTECNOLÓGICO DE ESPÉCIES DE ANNONACEAE (Annona cacans, Annona squamosa, Annona mucosa ou Guatteria hispida), BP.DR
• Assunto(s): Fitoquímica Bioensaio Biotecnologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: bioensaios | biotecnologia | culturas de células | Fitoquímica | PDT antimicrobiana | Bioensaios, Fitoquímica, cultura de células

Resumo

A pesquisa de produtos naturais tem sido uma estratégia simples e bem sucedida que contribui para a descoberta de novos medicamentos e aplicações tecnológicas (Harvey, 2000). Nos países industrializados, 25 % dos medicamentos prescritos contém pelo menos um componente ativo derivado do reino vegetal. No entanto, na terapêutica, o número de medicamentos disponíveis para o tratamento de doenças infecciosas e de tumores neoplásicos é muito limitada devido à baixa eficiência e direccionamento não específico. Estas limitações podem ser relacionadas com a baixa solubilidade, toxicidade, resistência celular e o tratamento a longo prazo (Soares & Cury, 2001). Sistemas de entrega de drogas pode ser usados a fim de melhorar a eficácia das moléculas bioativas. Entre eles podemos citar as ciclodextrinas (CDs), micelas anfifílicas de bloco de copolimero (MAPA) e lipoproteínas de baixa densidade (LDL). A entrega da droga por nanovetores envolve processos complexos e resultam em um sistema de libertação de fármaco seletivo. Assim, nosso objetivo é gerar e implementar o conhecimento para melhorar a hidro-solubilidade dos alcalóides bioativos e sua estabilidade química. A pesquisa será concentrada na caracterização espectroscópica de complexos de alcalóides/carreadores. Avaliar-se-a o efeito dessas interações em modelos biológicos tais como membranas modelo, microorganismos (bactérias e fungos) e culturas de células (linhagens tumorais). Objetiva-se, também, investigar o impacto na localização intracelular dos alcalóides e dos complexos e as consequências no efeito biológico. O guropo da França e o grupo brasileiro combinarão suas especialidades complementares e unirão forças para elucidar o papel da bioatividade desses produtos naturais e estudar a interação de alcaloides presentes em espécies vegetais nativas com nanovetores e correlação com efeitos biológicos. Além disso, uma importante limitação do seu uso está relacionado ao seu caráter hidrofóbico com essa pesquisa pretende-se solucionar esse problema. Em seguida, pretende avaliar várias estratégias de vetorização para melhorar suas atividades biológicas. Assim, o foco geral do projeto é estudar a dinâmica de produtos naturais interações (alcalóides isoquinolínicos, tais como, isomoschatoline e palmatina com nanocarriadores (lipoproteínas, ciclodextrinas ou nanopartículas). Pretende-se explorar as propriedades quimicas e biológicas dos complexos e apontar as possíveis aplicações em microbiologia e infectologia. Neste contexto, uma atenção particular será dada ao potencial fotoquimico dos produtos naturais, mencionados. A palmatina (PA) (pureza > 99 %) sera obtido a partir de Sigma Aldrich. A isomoschatolina (ISO) foi obtida por isolamento a partir do extrato de bruto metanolico das casca da espécies native brasileira Guatteria hispida. O isolamento e caracterização desse alcalóide foi realizado no Laboratório de Farmacognosia, Biociencia e Tecnologia de Produtos Bioativos, do Departamento de Biologia Vegetal, Instituto de Biologia, faculdade de Farmácia, UNICAMP, Campinas, Brasil, sob a orientação do Prof Dr. Marcos José Salvador. Com este material os testes pertinentes serão realizados para atender aos objetivos propostos neste projeto que será supervisonado pela professora Dra. Stephanie Bonneau, através de um estágio no laboratório" Jean Perrin, CNRS UMR 8237 , Université Pierre et Marie Curie , Paris, França. Os complexos sólidos são obtidos e serão obtidas medidas de absorção em um espectrofotômetro UV -VIS. Serão avaliados os efeitos tóxicos dos alcalóides sobre a cultura de fibroblatos humanos (cepa HS68) através da medição do efeito citocida após o tratamento com os alcalóides no escuro, sem exposição à luz e irradiação. Proceder-se a ensaios de citometria de fluxo e captação celular de fotossensibilizantes complexados com LDL além de ensaios de co-localização e testes envolvendo PDT antimicrobiana. (AU)