Detecção e caracterização genética de amostras compatíveis com a variante antigênica 2 (AgV2) do vírus da raiva (RABLV) pela técnica de RT-PCR em tempo real (RT-qPCR)

• Processo: 17/18812-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2018
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2018
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Medicina Veterinária Preventiva
• Pesquisador responsável: Karin Corrêa Scheffer Ferreira
• Beneficiário: Yasmin Machado de Freitas
• Instituição Sede: Instituto Pasteur (IP). Coordenadoria de Controle de Doenças (CCD). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Raiva (doença infecciosa) Técnicas e procedimentos diagnósticos Reação em cadeia da polimerase em tempo real
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Caracterização genética | diagnóstico antemortem | Raiva humana | RT-­PCR em tempo real | sonda de hidrólise | Medicina Veterinária Preventiva

Resumo

No diagnóstico antemortem da raiva em humanos, pode-se empregar a pesquisa de anticorpos neutralizantes e a identificação do antígeno do vírus da raiva pela técnica de imunofluorescência direta, e isolamento viral. A acurácia e sensibilidade dessas técnicas tradicionais apresentam grande variação de sucesso. O Instituto Pasteur, laboratório referência nacional para diagnóstico da raiva humana, preconiza para o diagnóstico antemortem desta enfermidade, a hemi-nested RT-PCR seguida de sequenciamento nucleotídico dos genes N e G do vírus da raiva. No entanto, apesar da acurácia dos referidos métodos de biologia molecular na identificação e caracterização genética do agente etiológico, esses procedimentos são trabalhosos e os resultados podem ser demorados. Em vista disso, técnicas como a RT-PCR em tempo real devem ser aprimoradas, devido à rapidez e precisão na obtenção de resultados, tanto na detecção quanto na caracterização genética do vírus da raiva. O presente estudo realizará a padronização da metodologia de RT-PCR em tempo real em amostras de RABLV de rua da linhagem genética compatível com a variante antigênica de cão (AgV2), as quais serão analisadas pelo sistema Taqman® (sonda de hidrólise). (AU)