Recuperação e purificação de anticorpos monoclonais por processos de cromatografia contínua de interação hidrofóbica

• Processo: 18/16533-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Pesquisa
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2019
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2020
• Área de conhecimento: Engenharias - Engenharia Química - Operações Industriais e Equipamentos para Engenharia Química
• Pesquisador responsável: Iara Rocha Antunes Pereira Bresolin
• Beneficiário: Iara Rocha Antunes Pereira Bresolin
• Pesquisador Anfitrião: Alois Jungbauer
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Ambientais, Químicas e Farmacêuticas (ICAQF). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus Diadema. Diadema , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Universität für Bodenkultur Wien, Áustria
• Assunto(s): Biotecnologia Cromatografia Processos de separação Anticorpos monoclonais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: anticorpos monoclonais | biotecnologia | Cromatografia | Processos de separação

Resumo

Anticorpos monoclonais (mAbs) têm sido muito aplicados na área terapêutica, que requer grandes quantidades do produto e alto grau de pureza, o que é atingido apenas por meio de métodos cromatográficos. Dentre eles, há a cromatografia de interação hidrofóbica que explora as características de hidrofobicidade dos mAbs. Contudo, um dos maiores problemas no desenvolvimento destes processos reside no tempo para a obtenção de grandes quantidades. Como alternativa pode-se utilizar o modo contínuo, no qual executa-se o processo com várias colunas, como na Cromatografia Periódica Contra-Corrente (PCCC), obtendo-se elevada produtividade e maior utilização da capacidade da coluna. Assim, este projeto tem como objetivo avaliar o efeito do tempo de residência, da concentração salina e do tipo de sal na adsorção de Trastuzumab em adsorventes de interação hidrofóbica (Toyopearl Phenyl-650 e Phenyl Sepharose 6 Fast Flow) visando sua purificação em um processo PCCC de 3 colunas. Serão realizados experimentos de adsorção de Trastuzumab, em batelada, com posterior caracterização da heterogeneidade utilizando as técnicas de espalhamento de raios-X a baixo ângulo (SAXS) e calorimetria diferencial de varredura (DSC). Em seguida, serão levantadas curvas de ruptura para determinação da capacidade de adsorção dinâmica em função do tempo de residência. Nos experimentos de purificação, para fins de seletividade e pureza serão analisadas as eletroforeses SDS-PAGE e ELISA. Conhecendo o tempo do experimento batelada e do ciclo contínuo, será avaliado o ganho de produtividade considerando o quanto de mAbs é purificado por hora em cada um dos modos de operação.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ANTUNES PEREIRA BRESOLIN, IARA ROCHA; LINGG, NICO; LAZZAROTTO BRESOLIN, IGOR TADEU; JUNGBAUER, ALOIS. Hydrophobic interaction chromatography as polishing step enables obtaining ultra-pure recombinant antibodies. Journal of Biotechnology, v. 324, n. S, 2020. (18/16533-1)